[理学]动物胚胎工程yyd前沿热点技术.pdf

第四篇 前沿热点技术 第八章 哺乳动物细胞核移植技术 内容目录 内容目录 核移植定义 核移植定义 核移植技术的研究历史及进展 核移植技术的研究历史及进展 哺乳动物核移植技术环节 哺乳动物核移植技术环节 核移植相关理论问题 核移植相关理论问题 核移植应用探讨 核移植应用探讨 问题与挑战 问题与挑战 一、核移植定义 一、核移植定义 一、核移植定义 核移植是指利用显微外科手术的方法将胚胎 核移植是指利用显微外科手术的方法将胚胎 细胞或成体细胞的细胞核移入去核的卵母细 细胞或成体细胞的细胞核移入去核的卵母细 胞中，构建成重组胚，通过体内或体外培养、 胞中，构建成重组胚，通过体内或体外培养、 胚胎移植，产生与供体细胞基因型相同的后 胚胎移植，产生与供体细胞基因型相同的后 代的技术过程，又称动物克隆技术。 代的技术过程，又称动物克隆技术。 二、核移植技术的发展 二、核移植技术的发展 实验设想的提出 实验设想的提出 Spemann的实验 Spemann的实验 二、核移植技术的发展 二、核移植技术的发展 Weissmann 提出的问题。 Weissmann 提出的问题。 Spemann’ s 的实验。 Spemann’ s 的实验。 1952, Robert Briggs (A) and Thomas J。 1952, Robert Briggs (A) and Thomas J。 King (B),两栖类核移植获得成功。 King (B),两栖类核移植获得成功。 STEP 1: Spemann tied a single strand of hair into a noose and pinched off a region of cytoplasm from a single celled salamander embryo STEP 2: The part of the cell containing the nucleus grew normally, and developed into a multi-celled embryo. The region of pinched cytoplasm remained unchanged STEP 3: Spemann loosened the noose, and allowed a nucleus from one of the embryo cells to enter the isolated region of cytoplasm STEP 4: Spemann then severed the multi- celled embryo from the cytoplasm. The region of cytoplasm, which now contained a nucleus, began to develop into a normal embryo 二、核移植技术的发展 二、核移植技术的发展 核移植技术发展的三个阶段 核移植技术发展的三个阶段 同种胚胎细胞克隆 同种胚胎细胞克隆 同种体细胞克隆 同种体细胞克隆 异种体细胞克隆 异种体细胞克隆 1、同种胚胎细胞克隆 1、同种胚胎细胞克隆 1952年，美国科学家Briggs和King将发育到后期的青蛙胚胎细胞核植入 青蛙卵中获得蝌蚪。 60年代，中国科学家童第周用鱼囊胚细胞核移植得到首批克隆鱼，后又 获得远缘克隆鱼。 1981年Illmensee和Hopps用小鼠胚胎细胞进行核移植，获得了小鼠，但 他们的实验没有被重复出来。 1986年，Willadsen用胚胎细胞克隆羊获得成功。 90年代，我国科学家利用胚胎细胞相继克隆成了兔、羊、猪、牛、小鼠 等几种动物。 1997年，中国学者孟励在美国首次用胚胎细胞克隆猴获得功。 首例胚胎细胞核移植哺乳动物一览表 物种 时间 供体细胞 作者 小鼠 1983 原核 McGrath JD 绵羊 1986 8-细胞卵裂球