松茸发酵培养基的优化教学幻灯片.pptVIP

松茸发酵培养基的优化 实验目的 1.掌握发酵培养基的配制方法 2.熟悉用正交试验优化发酵培养基的方法 实验原理 1.确定培养基的基本组成 2.确定所用原材料的种类 3.确定所用原材料的浓度配比关系 一、培养基的设计 1.单因素法 2.正交试验法 3.均匀试验设计 4.响应面法 二、培养基优化方法 1.概念 利用已经设计好的表格--正交表--来安排试验并进行数据分析的一种方法。 它是从全面试验中挑选出部分有代表性的点进行试验，这些有代表性的点具备了“均匀分散，齐整可比”的特点，是一种高效率、快速、经济的实验设计方法。 三、正交试验法 记号：Ln（tm） L：正交表的符号 n：表的行数（可安排试验的次数） t：表中的字码数（水平数） m：表的列数（最多可安排因素个数） L8(27) L9(34) L16(45) 2.基本工具——正交表 3.正交表的特点 试验点分布均匀、整齐可比 任何一列中各字码（水平）都出现，且出现的次数相等 任何两列中各横行组成的数字对，包含着所有可能的数字对，且各种数字对出现的次数相等 （1）明确任务 确定指标 （2）制定因素水平表 1）确定因素（A、B、C……） 2）选择因素的变化范围 3）确定因素水平数 4）制定因素水平表 因素水平 A淀粉/% B黄豆饼粉/% C蛋白胨/% 1 5 3 0.2 2 7 5 0.4 3 9 7 0.6 4.实验的基本步骤 （3）设计试验方案 1）选择正交表 2）表头设计（不混杂） 3）列出试验方案 4）进行实验 因素 实验号 A B C 结果 1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 1 1 2 2 2 3 3 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 3 1 2 2 3 1 B ：对计算结果进行分析，分析各因素的主次和影响趋势，找到最优试验方案。 比较RA 、RB、RC值，R值越大的因素，影响越大，控制要越严格，R值越小的因素，影响越小。 对每一个因素，选择K值最大的水平为最佳条件。 如：对于因素A 淀粉，若k2K1k3 ，即k2最大，根据因素水平表中的设计，其水平为7%。表明7%为最佳的淀粉浓度。对于因素B ，k2最大，对于因素C ，k3最大。则实验的最佳实验条件为： A2 B2 C3，即最佳实验条件为：淀粉为7%，黄豆饼粉5%，蛋白胨0.6% 若某一因素k3或者k1 最大，则说明所选择的该因素的水平范围不合适， 如：对于因素C，k3最大，说明因素水平表中所设计的最高水平0.6% 不一定为最佳。如果该因素的R值较大，影响较显著，则必须进行重复实验或对照实验。 其中对照实验条件应为： 试验1： A2 B2 C3 试验2： A2 B2 C4 C4应大于C3 对照两者的结果，若试验1结果值大于试验2，则试验1条件即为最优化条件。若试验2结果值大于试验1，则应再改变因素C的水平，继续做对照实验，直至达最佳结果。 C：验证实验 本实验以菌体生物量为指标，用四因素三水平的正交试验确定松茸液体发酵的最优培养基。 实验步骤 一、培养基的配制 表1 正交试验表设计 1.将土豆、葡萄糖、KH2PO4、MgSO4作为培养基的主要影响因素，每一因素设定3个水平，进行四因素三水平的正交试验，试验设计如表1 因素水平 A土豆/% B葡萄糖/% C KH2PO4/% D MgSO4/% 1 10.0 1.0 0.1 0.05 2 20.0 2.0 0.3 0.15 3 30.0 3.0 0.5 0.25 表2 正交表实验方案 2.按表2配制9组培养基入100ml锥形瓶中，每瓶25ml。（可四小组分工合作） 因素 A土豆/% B葡萄糖/% C KH2PO4/% D MgSO4/% 菌重 实验1 1(10.0) 1(1.0) 1(0.1) 1(0.05) 实验2 1(10.0) 2(2.0) 2(0.2) 2(0.15) 实验3 1(10.0) 3(3.0) 3(0.3) 3(0.25) 实验4 2(20.0) 1(1.0) 2(0.2) 3(0.25) 实验5 2(20.0) 2(2.0) 3(0.3) 1(0.05) 实验6 2(20.0) 3(3.0) 1(0.1) 2(0.15) 实验7 3(30.0) 1(1.0) 3(0.3) 2(0.15) 实验8 3(30.0) 2(2.0) 1(0.1) 3(0.25) 实验9 3(30.0) 3(3.0) 2(0.2) 1(0.05)