基础生物学技术试验指导书-水产科学与技术试验教学中心-集美大学.PDF

基础生物学技术 实验指导书 集美大学水产学院 2008 年4 月 目 录 绪 论 1 一 实验室规则 1 二 实验室安全及防护知识 2 三 实验记录与实验报告 4 第一章 生物化学试验技术 7 实验一 蛋白质的显色反应 7 实验二 蛋白质的水解和氨基酸的纸层析法分离 11 实验三 蛋白质的粗提及含量测定（考马斯亮蓝G-250 法） 14 实验四 还原糖和总糖含量的测定（3，5-二硝基水杨酸比色法） 17 实验五 过氧化氢酶活性的测定——碘量法 20 实验六 维生素C 的定量测定 27 实验七 葡聚糖凝胶柱层析法基本训练 29 第二章 组织学与胚胎学实验技术 31 实验一 动物组织切片技术 31 实验二 动物组织的鉴别和胚胎发育的比较 44 第三章 生理学实验技术 57 实验一 坐骨神经-腓肠肌标本的制备 57 实验二 水产动物血液常规检测 61 实验三 血液免疫学实验 70 实验四 水产动物消化酶的测定 73 实验五 水产动物耗氧率的测定 76 实验六 水产动物应激状态生理学指标的测定 80 实验七 植物呼吸作用和光合作用强度的测定 89 第四章 遗传育种学实验技术 95 实验一 鱼类肾细胞的染色体制作技术 95 实验二 染色体核型分析方法 98 实验三 鱼类肝脏酯酶同工酶的电泳分析 102 实验四 鱼类DNA 的简易提取法 105 实验五 DNA 浓度测定与纯度鉴定 107 实验六 聚合酶链式反应（Polymerase Chain Reaction，PCR ） 109 实验七 DNA 的琼脂糖凝胶电泳 113 绪 论 一 实验室规则 1．实验前必须认真预习实验内容，明确本次实验的目的和要求，掌握实验原理， 写好实验预习报告，否则不能进行实验。 2 ．实验时自觉遵守实验室纪律，保持室内安静，不大声说笑和喧哗。 3 ．实验过程中要听从教师指导，认真按照实验步骤和操作规程进行实验。若想 改进和设计新的实验方法，必须取得教师的同意。实验时认真进行实验记录，实验完 毕及时整理数据，按时上交实验报告。 4 ．实验台面、称量台、药品架、水池以及各种实验仪器内外都必须保持清洁整 齐，药品称完后立即盖好瓶盖放回药品架，严禁瓶盖及药勺混杂，切勿使药品（尤其 是NaOH ）洒落在天平和实验台面上，毛刷用后必须立即挂好，各种器皿不得丢弃在 水池内。 5 ．配制试剂和用无离子水要注意节省，按实验实际使用量配制，多余的重要试 剂和各种有机试剂要按教师要求进行回收，不得丢弃。 6 ．配制的试剂和实验过程中的样品，尤其是保存在冰箱和冷室中的样品，必须 贴上标签、写上品名、浓度、姓名和日期等，放在冰箱中的易挥发溶液和酸性溶液， 必须严密封口。 7 ．配制和使用洗液必须极为小心，强酸强碱必须倒入废液缸或冲稀后排放。 8．使用贵重精密仪器应严格遵守操作规程。使用分光光度计时不得将溶液洒在 仪器内外和地面上。仪器发生故障应立即报告教师，未经许可不得自己随意检修。 9 ．实验室内严禁吸烟、饮水和进食，严禁用嘴吸移液管和虹吸管。易燃液体不 得接近明火和电炉，凡产生烟雾、有害气体和不良气味的实验，均应在通风条件下进 行。 10．实验完毕必须及时洗净并放好各种玻璃仪器，保持实验台面和实验柜内的整 洁。 11．严禁抄拿他组仪器，不得将器皿遗弃在分光光度计内和其他实验台面上，打 破了玻璃仪器要及时向教师报告，并自觉登记，按规定进行处理。 12．每位学生要熟悉实验室内电闸的位置，烘箱和电炉用毕必须立即断电，不得 1 过夜使用，要严格遵守实验室安全用电规则和其他安全规则。 13．每日实验完毕，值日生要认真做好实验室的卫生值日工作。最后离开实验室 的实验人员，必须检查