临床免疫操作规程.doc

淄博万杰肿瘤医院　检验科 临床免疫室标准操作规程 文件编号 编制部门 检 验 科 发布日期 2004年9月28日 实施日期 2004年10月8日 版 本 2.0 页 数 共X页 编 制 张淑芳 审 核 梁　勇 批 准 朱才义 文 件 受 控 号 文件修订稿 修 订 记 录 修订版次 修 订 日 期 页码 对应 条款 修 订 内 容 批 准  目 录 1　乙型肝炎病毒表面抗原检测标准化操作规程 2　乙型肝炎病毒表面抗体检测标准化操作规程 3　乙型肝炎病毒e抗原检测标准化操作规程 4　乙型肝炎病毒e抗体检测标准化操作规程 5　乙型肝炎病毒核心抗体检测标准化操作规 6　丙型肝炎病毒抗体检测标准化操作规程 7　抗链球菌溶血素“O”检测标准化操作规程 8　类风湿因子（RF）检测标准化操作规程 9 梅毒螺旋体抗体胶体金检测标准化操作规程 10 爱滋病Ⅰ、Ⅱ型抗体（HIV-抗体）检测标准化操作规程 11 C反应蛋白（CRP）检测标准化操作规程 12　肺炎支原体抗体检测标准化操作规程 13　胃幽门螺杆菌抗体检测标准化操作规程 14　肥达氏、外斐氏反应标准化操作规程 15　冷凝集试验标准化操作规程 1　乙型肝炎病毒表面抗原检测标准化操作规程 1.1　操作步骤： 平衡：将试剂各组分从盒中取出，平衡至室温（18℃~25℃），微孔板开封后，余者即以自封袋封存。 配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1:19稀释后使用。 加样：分别用加样器在对照孔中加入阴性或阳性对照血清50 μl或待检测血清样品50 μl于相应孔中。 加酶：分别在每孔中加入酶标记抗体50 μl；轻拍混匀。 温育：置37℃温育30分钟，室温平衡5分钟。 5次，洗涤完后扣干（每次应保持30~60 显色：每孔加底物A、B各50 μl，轻拍混匀，置37℃暗置15分钟。 50 μl，混匀。 测定：用酶标仪单波长450 nm或双波长450 nm/630 nm测定各孔OD值（用单波长测定时需设空白对照孔，30分钟内完成测定，并记录结果）。 1.2　结果判定： 临界值（C.O.）的计算：临界值＝阴性对照孔OD均值×2.1 阴性对照OD值大于0.1时应重新试验，小于0.05时以0.05计算 结果判定：样品OD值S／C.O.1者为HBsAg阳性 样品OD值S／C.O.1者为HBsAg阴性 1.3　注意事项： 每板建议设阴、阳对照血清各两孔，设空白对照时，不加样品及酶标记抗体，其余各步相同。 洗涤时各孔均须加满，防止孔口内有游离酶未能洗净。 加试剂前应将试剂瓶翻转数次，使液体混匀，如果滴加，滴加前应弃去1~2滴，滴加时瓶身应保持垂直，以使滴量准确。注意勿将试剂滴在孔壁上。 所有样品都应按传染源处理。 样品显色深浅与样品中抗原含量没有一定正相关，任何一种测试都不能绝对保证样品中没有低浓度的抗原存在。 不同品名、不同批号的试剂不可混用，以免产生错误结果。 2~8℃避光保存。 2　乙型肝炎病毒表面抗体检测标准化操作规程 2.1　操作步骤： 平衡：将试剂各组分从盒中取出，平衡至室温（18℃~25℃），微孔板开封后，余者即以自封袋封存。 配液：浓缩洗涤液配制前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1:19稀释后使用。 加样：分别用加样器在对照孔中加入阴性或阳性对照血清50 μl或待检测血清样品50 μl于相应孔中。 加酶：分别在每孔中加入酶标记抗原50 μl；轻拍混匀。 温育：置37℃温育30分钟，室温平衡5分钟。 5次，洗涤完后扣干（每次应保持30~60 显色：每孔加底物A、B各50 μl，轻拍混匀，置37℃暗置15分钟。 50 μl，混匀。 测定：用酶标仪单波长450 nm或双波长450 nm/630 nm测定各孔OD值（用单波长测定时需设空白对照孔，30分钟内完成测定，并记录结果）。 2.2　结果判定： 临界值（C.O.）的计算：临界值＝阴性对照孔OD均值×2.1 阴性对照OD值大于0.1时应重新试验，小于0.05时以0.05计算 结果判定：样品OD值S／C.O.1者为HBsAb阳性 样品OD值S／C.O.1者为HBsAb阴性 2.3　注意事项： 每板建议设阴、阳对照血清各两孔，设空白对照时，不加样品及酶标记抗原，其余各步相同。 洗涤时各孔均须加满，防止孔口内有游离酶未能洗净。 加试剂前应将试剂瓶翻转数次，使液体混匀，如果滴加，滴加前应弃去1~2滴，滴