申克孢子丝菌.doc

申克孢子丝菌 1检验目的：从病损中分离申克孢子丝菌。 2标本来源：脓液，痰、血及活组织等。 3标本收集和制备： 脓液：取标本时损害周围应先用70%酒精消毒，对溃破的皮损可刮取脓液，若窦道和瘘道则应刮取窦道和瘘道壁，尽量从较深部位获取标本，应包括部分管壁周围组织，未溃破的脓肿最好使用无菌注射器穿刺抽吸。 痰液：标本取晨痰，起床后刷牙，并用无菌蒸馏水漱口数次，包括仰头深刷喉咙，也可在饭后3~4h刷牙漱口后取痰。取痰时应用力咳嗽，咳出肺部深处痰，吐入广口有盖的无菌玻璃瓶中，盖紧，吐痰时尽量不要有唾液，痰量宜3~5ml，立即送检。 血液：无菌抽取4ml血液置于无菌抗凝管中，立刻送检。 组织：组织标本包括尸检和活检材料。标本可来源于皮肤、淋巴结、息肉、溃疡、伤口或其他损害，也可以自于全身任何组织器官。 4检测步骤：⑴直接镜检：取脓液，痰、及活组织加10% KOH ，加盖盖玻片，然后置镜下检查。 ⑵培养检查：取脓液，痰、血及活组织接种于沙氏培养基，25℃培养2周。在高营养培养基上，37℃培养培养2周。 5结果判断: ⑴直接镜检：可疑标本涂片作革兰染色或PAS染色，油镜下可见在多核粒细胞内或大单核细胞内外有革兰阳性的常圆形雪茄烟样或棱形小体，大小为1~2um*3~7um，但只有少数患者中查到此菌体。 ⑵培养检查：① 菌落特征 室温时在葡萄糖蛋白琼脂培养基上为菌丝相生长，SDA25°生长迅速，初为灰色、褐色至黑色湿润、光滑、酵母样菌落，很快菌落形成有褶皱、绒毛样菌落。多次转种，颜色变浅。在胱氨酸葡萄糖血琼脂或脑心浸液葡萄糖血琼脂上，37°培养时呈酵母相生长。②显微镜特征 ：菌丝相可见纤细分支分隔菌丝，直径约1~2um。分生孢子梗由菌丝侧呈锐角长出，纤细而长，顶端变尖，分生孢子球形、椭圆形，如梅花样。分生孢子大小不等，2~3*3~5un直径。另一类分生孢子球形或三角形，较大呈黑色，合轴排列于菌丝四周，成为套袖状菌丝。 6.临床意义：直接镜检阳性说明有真菌感染，但阴性不能除外诊断。 培养的意义：从临床标本中分离申克孢子丝菌，以确定是否有真菌感染。  检 验 科 文件编号： SLYY-JYK-SOP- SH-1 第 2 页 共 3 页 第 1 版 第 0 次修改 申克孢子丝菌 编制人 批准人 启用日期 陈瑞娥 金炎 2009年09月19日