须癣毛癣菌.doc

须癣毛癣菌 异名： 须癣小孢霉、石膏样毛癣菌、颗粒状毛癣菌、趾间毛癣菌、足部毛癣菌等 1检验目的：从病损中分离须癣毛癣菌。 2标本来源：皮屑、甲屑、毛发等。 3标本收集和制备： 皮屑：⑴检查前一周，皮损部位不应使用抗真菌药物。取材前局部用70%酒精彻底消毒，不能使用酒精的部位可用无菌蒸馏水清洗数次。 ⑵接种刀火焰消毒冷却后，轻轻刮取皮屑，滴一滴5%~10%KOH直接检查。 ⑶由于癣具活动的边缘从最新的皮损处采取，皮损为水疱，应取疱壁检查而将疱液弃去。若为脓疱，应取脓液。 甲屑：病甲局部用70%酒精消毒，刮取正常甲与病甲交界处并且贴近甲床部的甲屑。 毛发：毛发检查应采取病发，病发表现为毛干上有结节或菌韒或毛发枯黄无光泽，脆易折断或松动易拨除。用棉球擦拭患处头皮取断发。直接检查取3~5根病发标本，加10%~20%KOH，火焰上快速通过数次，易不沸为度。 4检测步骤：⑴直接镜检：取皮屑、甲屑或3-5根病发加10% KOH ，加盖盖玻片，然后置镜下检查。 ⑵培养检查：取皮屑、甲屑或病发标本5~10根75%酒精消毒后接种于沙氏培养基，25℃培养2周。 5结果判断： 直接镜检：发外链状大孢子，皮、甲内菌丝或孢子。 培养检查： ⑴菌落特征 中等快速生长，质地毛状到粉状或颗粒状，表面呈白色到乳油色；背面呈黄色、褐色或红褐色。 ⑵显微镜特征 常存在螺旋菌丝，小分生孢子单细胞，圆形到梨形，呈簇状或未成熟的葡萄状通常数量多，在亲人性分离菌有时罕见。大分生孢子多分隔，呈棒形，壁薄，光滑，孤立，有2~8隔，常缺乏。 生理学试验： 尿素酶试验（+）； 不需要生长因素； BCP-MSG：系II类反应，7~10天培养基明显的碱性变化（紫色）和非常丰富的生长； 在PDA、CMA上不产生红色素； 毛发穿孔试验：（+）。 鉴别要点： 菌落形态，尿素酶阳性，毛发穿孔，集簇的小分生孢子和螺旋菌丝，典型的分生孢子，交配试验。 6临床意义：直接镜检阳性说明有真菌感染，但阴性不能除外诊断。 培养的意义：从临床标本中分离须癣毛癣菌，以确定是否有真菌感染。