天狼星红染色方法.doc

1、来自丁香园 Sirius red苦陈酸染色法[试剂配制](1)天狼星红饱和苦昧酸液 O．5％天狼星红10ml，苦味酸饱和液90ml。(2)天青石蓝液 天青石蓝B1．25g．铁明矾1．25g，蒸馏水250ml。溶解煮沸、待冷却过滤加入甘油30ml，然后再加入浓盐酸0．5ml。[染色步骤](1)中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水。(2)人大青石蓝液染5一lOmin。(3)蒸馏水洗3次。(4)天狼星红饱和苦昧酸浓染15-30min(5)无水乙醇直接分化与脱水。二甲苯透明，中性树胶封固。[注意事项](1)细胞核里染色可以用Harris苏木素染色液谈染。(2)染色封固后的切片，须及时用偏光显微镜进行观察和照相已保持鲜艳的色彩注：在偏光显微镜下可以观察到四种类型的胶原纤维。l型胶原纤维：紧密排列，显示很强的双折光性，呈黄色或红色的纤维oll型胶原纤维：显示弱的双折光，呈多种色彩的疏松网状分布。皿型胶原纤维：显示弱的双折光，呈绿色的细纤维。lv型胶原纤维：显示弱的双折光的基膜，呈淡黄色。Sirius Red Staining Protocol for Collagen John A. Kiernan Department of Anatomy Cell Biology, The University of Western Ontario, LO