真菌及厌氧菌药敏试验的规范化.docVIP

真菌及厌氧菌药敏试验的规范化 一、抗真菌药物敏感试验的规范化 （一）高危人群的增多是真菌感染不断增加的原因 20世纪80年代以来，真菌感染不断增加，这与高危人群的增多有关系，高危人群包括：骨髓和实体器官移植、广谱抗生素治疗、肿瘤和免疫抑制治疗、插管等侵袭性治疗以及AIDS患者。 （二）真菌感染新趋势 以前的真菌感染以念珠菌为主，而念珠菌中以白色念珠菌所占比例最高。最近的调查显示，白色念珠菌感染率减少了50-60%，非白念珠菌如光滑念珠菌的感染率已经占到了20-25%，热带念珠菌占到了20%，而近平滑念珠菌和克柔念珠菌的比例也在不断上升。此外，新型隐球菌、烟曲菌、黄曲霉菌、构巢曲菌、毛霉菌的感染比例也呈上升的趋势。实验室工作中应当注意，约有50%患者生前培养是阴性，这是因为曲霉菌早期不入血。 （三）关于抗真菌药物敏感试验的采用建议 目前抗真菌药物敏感试验的应用领域在于新药研发、耐药监测及临床标本这三个领域。下表是关于抗真菌药物敏感试验的采用建议： 疾病 建议 立的粘膜念珠菌病 经验性治疗，不做药敏 复发的粘膜念珠菌病 菌种鉴定，如果治疗失败，应做体外的抗真菌药敏试验。 高危患者中念珠菌定植 菌种鉴定，依据当地耐药监测结果选择抗真菌药物 念珠菌血症及深部感染 菌种鉴定，应用唑类药物 深部感染需要延长治疗时 对所有菌株都测药敏 （四）常见抗真菌药物 ???? 各类抗真菌药物的抗菌谱怎样？如何选择适当的抗真菌药物进行药敏试验呢？ 下表是一些常见抗真菌药物的作用机制及作用真菌： ? ? ? 分类 常见药物 作用机制 作用真菌 多烯类 两性霉素B两性霉素B脂质体 制霉菌素 与真菌细胞膜的麦角固醇相结合，引起渗透性不稳定和膜完整性的损伤 两性霉素B和两性霉素B脂质体：念珠菌、新型隐球菌、曲霉、毛霉、孢子丝菌、组织胞浆菌等。 制霉菌素：皮肤及黏液感染的念珠菌。 吡咯类 咪唑类 ：酮康唑 ????三唑类 ：氟康唑、伊曲康唑 抑制细胞色素P450 14α去甲基化酶，从而抑制麦角杂醇的合成 酮康唑：深部念珠菌、球孢子菌、组织胞浆菌、孢子丝菌、毛发癣菌等。 ????氟康唑：对多数念珠菌、隐球菌、球孢子菌具有抗菌活性，然而克柔念珠菌对氟康唑天然耐药，光滑念珠菌表现为剂量依赖性敏感。 抗代谢类 5－氟胞嘧啶 干扰嘧啶代谢阻断核酸合成 作用真菌为念珠菌、隐球菌等，单用易产生耐药，故常与两性霉素B或氟康唑联合使用，5－氟胞嘧啶与两性霉素B联合使用治疗隐球菌性脑膜炎收到了良好的疗效。 棘白菌素类 卡泊芬净 ????米卡芬净 ????阿尼芬净 通过非竞争性抑制β-(1,3)-D-葡聚糖苷合成酶,从而破坏真菌细胞壁糖苷的合成 卡泊芬净:具广谱抗真菌作用，对曲霉属、念珠菌属具优良抗菌活性，对丝状真菌和一些双相真菌具一定抗菌活性，新型隐球菌天然耐药。 ????米卡芬净：对念珠菌属具杀菌作用，对曲霉属具有良好的抗真菌作用，对双相真菌的菌丝相有效，对新型隐球菌、镰孢霉、毛孢子菌的作用差。 ????阿尼芬净：对酵母包括对氟康唑耐药的念珠菌属、双相真菌、曲霉等真菌具良好抗真菌作用，对新型隐球菌无作用。 第二代三唑类药物 伏立康唑 ????泊沙康唑 ????雷夫康唑 ? 伏立康唑:具广谱抗真菌作用，对曲霉、赛多孢菌、镰孢菌、新型隐球菌、念珠菌属包括耐氟康唑菌株均具有抗菌活性。 （五）各种药物的抗真菌谱比较 上表为各种药物抗真菌谱的比较。可见： 1、 两性霉素B的抗真菌谱最广，唯一缺陷为对卡氏肺孢子虫无抗真菌活性。 2、 三唑类药物如伊曲康唑、伏立康唑、泊沙康唑、雷夫康唑的抗菌谱较广，但对卡氏肺孢子虫也无抗菌活性。 3、 棘白菌素类的药物对卡氏肺孢子虫有活性，但对新型隐球菌无抗菌谱。 4、 氟康唑的抗菌谱比较少。 5、 两性霉素B、三个三唑类药物、三个棘白菌素类的药物对烟曲酶都有抗真菌活性，但对毛霉、根酶和镰刀霉只有两性霉素B才有抗真菌活性。 （六）抗真菌药物药敏试验方法 ???? 常用的抗真菌药物药敏试验有哪些？规范的操作是怎样的？ （一）液基法 1．试管（宏量）液基稀释法： 抗真菌药物的宏量稀释法是CLSI、NCCLS分委会提出的第一个方法，但在临床中使用较麻烦。 ? 宏量液基稀释法 2．微量液基稀释法 （1）应用范围：侵袭性感染的酵母菌，包括念珠菌和新型隐球菌。 （2）培养基：使用含有L－谷氨酰胺及酚红指示剂、不含碳酸氢钠的RPMI 1640液。 （3）药物的溶解、稀释和贮存：抗真菌药物敏感实验应使用药物标准品，不同药物所选择溶剂不同（氟康唑、氟胞嘧啶用灭菌蒸馏水溶解；两性霉素B、酮康唑、伊曲康唑应使用二甲亚砜溶解），