专题一 基因工程和细胞工程 讲义.docVIP

专题一　基因工程和细胞工程　　1.基因工程的诞生(Ⅰ)。　2.基因工程的原理及技术(Ⅱ)。　3.基因工程的应用(Ⅱ)。　4.蛋白质工程(Ⅰ)。　5.植物的组织培养(Ⅱ)。　6.动物的细胞培养与体细胞克隆(Ⅱ)。　7.细胞融合与单克隆抗体(Ⅱ)。 专题知识检测　　　　　　　　　　　　　　　　　 1．基因工程的基本工具 限制酶、DNA连接酶、载体。 2．目的基因的获取方法 从基因文库中获取、用PCR技术扩增、人工合成等。 3．表达载体的构建 目的基因的表达载体由目的基因、标记基因、启动子和终止子等部分组成。 4．将目的基因导入受体的方法 将目的基因导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法，导入动物细胞最常用的方法是显微注射法，导入微生物最常用的方法是Ca2＋处理法。 5．目的基因的检测与表达 (1)分子水平的检测：检测目的基因是否导入受体细胞可用DNA分子杂交技术；检测目的基因是否转录，可用分子杂交技术；检测目的基因是否翻译出蛋白质，可用抗原—抗体杂交技术。 (2)个体水平的检测：通过抗虫、抗病接种实验，检测个体是否抗虫或抗病。 6．植物组织培养技术 (1)原理：植物细胞具有全能性。 (2)过程 7．植物体细胞杂交技术 (1)去壁：酶解法，所用酶为纤维素酶和果胶酶。 (2)诱导原生质体融合：物理法——离心、振动、电激等；化学法——常用聚乙二醇(PEG)作诱导剂。 (3)植物体细胞杂交成功