浅论三种芽孢杆菌vip3A基因及特异Bt株上清液毒性成分研究.pdfVIP

南开大学硕士研究生毕业(学位)论文 摘要 摘要 虽然以苏云金芽孢杆菌(Bt)为主的生物农药的相关研究有了很大的发展， 但是在Bt的应用过程中仍有许多问题需要解决。如目前仍有一些全球性重 要农业害虫对已发现的杀虫晶体蛋白仍不敏感，如鳞翅目的甜菜夜蛾，小 地老虎等。另外，害虫对广泛使用的ICPs产生了抗性，对单个Cry蛋白 的抗性还会引起害虫对与之同源的杀虫蛋白的交叉抗性。存在于发酵上清 液中的营养杀虫蛋白(Vip)是一类全新的杀虫物质，与Cry蛋白没有任 何同源性。对于解决上述问题有着非常重要的意义。 本文以本室多年来筛选保留，具有重要特异性的Bl以及有代表性的腊状芽 孢杆菌(Bc)和球形芽孢杆菌(Bs)菌株为试材，利用PCR方法检测了30株Bt， 19株显示有特异扩增带，咖甜基因菌株阳性率63％，远远高于以往文献报道值 同种属中分布的知识是很有意义的；检测Bs菌株共4株，没有菌株显示有特异 扩增带。通过对高效特异株15A3和9816C菌株及其质粒消除株的基因检测， 初步认定vip3A基因定位于质粒上。 同，推测其可能至少含有三种潜在的新vip3A类基因。其克隆、测序工作正在进 行。