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化学与生物工程系： 胞 生 物 学 实 验 指 导 专 业 ：生物 技 术 指导老师：陈 春 岚 1 PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 实验一 细胞和细胞内含物的观察 细胞质内含有多种细胞器。有些细胞器如线粒体、高尔基体、内质网、溶酶 体等普遍存在于各种细胞中，而另有些细胞器如叶绿体，只存在于植物细胞中。 细胞质内的这些结构，除叶绿体外，一般在光学显微镜下不易看见，必须经过一 定的固定染色方法处理后，才能看到大多数细胞器，或直接用相差显微镜观察。 线粒体 线粒体是一种动态的易变结构。经过处理在光学显微镜下呈现为颗粒状、棒 状或弯曲细线。线粒体的形态和数量随不同生物、不同组织及不同生理状态而发 生变化，例如肝细胞、胰细胞的线粒体通常呈线状，成熟的卵细胞内线粒体呈颗 粒状，肾细胞内的线粒体呈棒状。显示线粒体的方法可以概括为以下几种： 1、生活细胞的观察。如将组织培养细胞或其他生活细胞，放在相差显微镜 下，就可以看到细胞质内有线状小体活动，这就是线粒体。 2、活细胞染色法。就是利用某些无毒或毒性较小的染料，显示出细胞内某 些特殊结构存在的真实性，而并不对细胞的活动有影响，如Janus green B （詹 纳斯绿 B），就是一种毒性较小的碱性染料。将其配制成一定浓度，对活细胞进 行染色，在细胞质内可以看到被染成蓝绿色的线状或颗粒小体，这就是线粒体。 还可看到其在细胞质内的活动状况。线粒体所以能显示出蓝绿色，是由于线粒体 中具有细胞色素氧化酶系统，它是染料始终处于氧化状态呈蓝绿色，而在周围的 细胞质中的染料被还原呈无色。 3、固定染色法 （即永久制片法）。用特殊的固定液染色处理动物的组织或细 胞后，可显示出线粒体的形态。但所用材料必须新鲜，否则线粒体常因已经破坏 而显示不出，线粒体的组成成分主要是脂蛋白，脂类又以磷脂 主，用于线粒体 的固定液含有饿酸，重铬酸钾等。因 两者均能使脂类物质保存下来，故可显示 出线粒体的形态。用于显示线粒体形态的固定、染色方法较多，常用的有Altmann 染色法、Regand 染色法及Chmpy-Kull 染色法等，但欲显示线粒体的细微结构， 则要用电镜技术。 4、生化分离提取方法。在一定的低温条件下，将组织细胞破碎制备成匀浆， 用于线粒体组分及其在不同生理状态的分离分析研究。 2 PDF 文件使用 pdfFactory Pro 试用版本创建 高尔基体 高尔基体显示的方法，目前使用较多的是： 1．固定染色法。1889 年Golgi 用镀银的方法显示出这种细胞器，目前仍应 用AgNO3 或饿酸处理材料，将高尔基体显示 棕黑色。这是由于AgNO3、饿酸在 高尔基体的部位被还原之故，所以显出高尔基体的形态及其在细胞内的分布。常 用的方法有DaFano 硝酸钴-硝酸银镀银法，Aoyama 镀银法及Romony Cajal 镀银 法等，而欲显示其细胞结构，就得使用电镜技术