高等植物的遗传学特征.pptVIP

A 高等植物的遗传学特征 B 高等植物基因工程的基本概念 C 高等植物的基因转移系统 D 利用报告基因展示高等植物基因表达与调控的信息 E 利用转基因植物生产功能蛋白 F 植物转基因技术在品种改良中的应用 抗病毒感染的转基因植物 烟草花叶病毒（TMV）是一种6.5kb大小的RNA病毒。该基因组编码4种多肽：两种复制酶亚单位，一种外壳蛋白，一种与细胞运动有关的蛋白质。 转基因植物在土壤农癌杆菌基因转移介质中将表达TMV的外壳蛋白（CP）。 抗病虫害的转基因植物 抗病毒感染的转基因植物 第十章 植物基因工程 遗传操作的简易性 整株植物的再生性 植物的基本特征 植物的基本特征 植 物 低 等 植 物 藻类 地衣 高 等 植 物 无根、茎、叶等分化器官 合子不经胚直接发育为个体 含根、茎、叶、花、果分化器官 合子经胚再发育为个体 苔藓门 蕨类门 裸子门 被子门 遗传操作的简易性 大多数高等植物具有自我授精的遗传特征，通常能产生大量的后代；而且借助于如风、重力、昆虫传播等自然条件，授精范围广、速度快、效率高。因此，即便是频率极低的基因突变和重组事件，其遗传后果也易被观察。 整株植物的再生性 植物损伤后，会在伤口长出一块软组织，称为愈伤组织。如果将一小片鲜嫩的愈伤组织取下，放在含有合适营养和植物生长激素的组织培养基中，则这些细胞便会持续生长并分裂成悬浮液。将这些细胞涂在特定的固体培养基上，就会长成新的幼芽，并且这些愈伤组织重新分化成为叶、根、茎，最终成为整株开花植物。 整株植物的再生性 植物细胞通常不能有效地吸收外源DNA，因为它们具有纤维素构成的细胞壁。可用纤维素酶处理植物细胞壁，形成原生质体，待吸收DNA分子后，经过再生，再通过愈伤组织形成培育出整株植物。这项技术有一定的局限性，即大多数单子叶农作物（如谷类作物）很难从原生质再生出完整细胞。 高等植物基因工程 高等植物细胞基因表达技术 高等植物转基因技术 转基因植株 植物工程细胞 农作物遗传性状改良 蛋白多肽物质大规模生产 小分子化合物大规模生产 Ti 质粒介导的整合转化程序 植物病毒介导的转染程序 植物细胞的直接转化程序 植物原生质体的再生程序 Ti 质粒介导的整合转化程序 几乎所有的双子叶植物尤其是豆科类植物的根部常常会形成根瘤，这是由于植物根部被一种革兰氏阴性土壤杆菌农杆根瘤菌（A.tumefaciens）感染所致，其致瘤特性是由该菌细胞内的野生型质粒 Ti（Tumor-inducing）介导的。 Ti 质粒的结构与功能 Ti 质粒的结构与功能 Ti 质粒的图谱 整个质粒 160 - 240 kb 其中 T-DNA 12 - 24 kb tms 的编码产物负责： 合成吲哚乙酸 tmr 的编码产物负责： 合成植物分裂素 tmt 的编码产物负责： 合成氨基酸衍生物 冠瘿碱 Ti 质粒的结构与功能 Ti 质粒致瘤的分子机制 损伤的植物根部会分泌出乙酰丁香酸和羟基乙酰丁香酸，它们能诱导Ti质粒上的vir基因以及根瘤菌染色体上的一个操纵子表达。vir基因产物将Ti质粒上的T-DNA单链切下，而根瘤菌染色体上的操纵子表达产物则与单链T-DNA结合形成复合物，后者转化植物根部细胞。 Ti 质粒的结构与功能 T-DNA的染色体整合机制 T-DNA的染色体整合机制 Ti 质粒的结构与功能 Ti 质粒的改造 除去T-DNA上的生长素（tms）和分裂素（tmr）生物合成基因，因为大量的生长素和分裂素会抑止细胞再生长为整株植物； 除去T-DNA上的有机碱生物合成基因（tmt）；因为有机碱的合成大量消耗精氨酸和谷氨酸，影响植物细胞的生长； 安装大肠杆菌复制子，使其能在大肠杆菌中复制，以利于克隆操作； 安装植物细胞的筛选标记，如 neor 基因，使用植物基因的启动子和polyA化信号序列； 安装多聚人工接头以利于外源基因的克隆。 除去 Ti 质粒上的其它非必需序列，最大限度地缩短载体的长度； 共整合转化程序 二元整合转化程序 将外源基因克隆在大肠杆菌-农杆菌穿梭质粒的T-DNA区内； 重组质粒直接转化农杆菌株，该菌株携带只含vir区不含T-DNA区的Ti辅助质粒； 以上述重组农杆菌感染植物细胞。 植物病毒介导的转染程序 随着植物病毒分子生物学及遗传学研究的不断深入，用病毒基因组作为载体转化植物细胞日益受到人们的重视，因为病毒载体能将外源基因导入植物的所有组织和细胞中，而且不受单子叶或双子叶的限制。 在大约300种特征清楚的植物病毒中，单链RNA病毒约占91%，双链RNA病毒、双链DNA病毒、单链DNA病毒各占3%。利用植物病毒载体转化植物细胞大致有以下两种战略： 植物病毒介导的转染程序 以双链DN