生长激素基础知识2010627上海.ppt

GH生理作用（二） 调节物质代谢 促进蛋白质合成，纠正负氮平衡。 调节脂代谢，降低机体脂肪储备，增加血清脂肪酸含量，降低血清胆固醇和低密度脂蛋白水平。 可降低细胞对胰岛素的敏感性，减少外周组织对葡萄糖利用，使血糖升高。 对水、矿物质代谢有重要作用。可使细胞内钾盐、磷酸盐潴留，还可促进肾小管钠回吸收，引起水、钠潴留。 重点 GH生理作用（三） 其他作用 增加机体免疫力，刺激免疫球蛋白合成，促进巨噬细胞和淋巴细胞增殖。 加速伤口愈合，刺激烧伤创面及手术切口成纤维细胞合成胶原。 促进心肌蛋白合成，增加心肌收缩力，降低心肌耗氧量。 GH具有抗衰老,促进脑功能效应;促进精子形成、排卵等 重点 GH的作用机制（一） 生长激素受体（GHR）和生长激素结合蛋白（GHBP） GHR是由620个AA组成的跨膜糖蛋白，包括胞外域、跨膜域和胞内域。 2个GHR形成同源二聚体，分别与1个GH分子上的2个不同位点结合，结合后受体的胞内部分与细胞质中JAK酪氨酸家族结合，使受体羧基端酪氨酸磷酸化，从而传递信号，发挥生物效应。 GHBP是膜受体的片段，可与GHR竞争与GH结合，所以GHBP可抑制过高的GH结合到组织受体上。 重点 JAK2 JAK2 P P GH 细胞膜 GH 受体 GH的作用机制（二） 胰岛素样生长因子（IGFs） GH对靶组织发挥效应，除了直接作用外，还通过IGFs的介导，尤其是对长骨的促生长作用。 现知有生物作用的IGF分为两类 IGF-1：碱性多肽，有强的促生长作用； IGF-2：中性肽，有强的胰岛素样活性，是胚胎生长、发育的调节因子。 合成IGF的部位极为广泛，几乎遍布体内所有组织，其主要合成部位在肝脏，其次是肾脏、骨骼肌等组织。其他许多组织局部也可合成，它们均接受GH的刺激，多数组织产生的IGF并不释放入血液，常通过旁分泌和自分泌的方式发挥作用。 垂体 肝 脏 局 部 直接作用，不依赖IGF-I 线性 生长 细胞内信号传导通路 三聚体（循环） 重点 总结 生长激素的分泌特点 生长激素分泌的影响因素 生长激素分泌的调节 生长激素的生理作用、作用机制 药用GH发展史 1993-, E. Coli 分泌型表达技术和蛋白质水相稳定技术相结合 1987-, E. Coli 和小鼠C127细胞分泌型表达技术 1985-2004, E. Coli 包涵体技术 1958-1985, 人垂体中提取 人垂体源性GH (somatotropin) 192AA-rhGH (somatrem) 191AA-rhGH (somatropin，粉剂) 191AA-rhGH (somatropin，水剂) 1999-, PLGA微球缓释技术的应用 长效 rhGH 粉剂 长效 rhGH 水剂 2007-, PEG 化学修饰等 长效技术的应用 人垂体源性 hGH (somatotropin) 1958年，Raben 首次从人垂体中成功提取hGH，Kabi 公司进行商业性销售 缺点: ﹡因来源受限，产量稀少 ﹡因含人类多种分子量的GH（主要是22 kDa，20 kDa，也有少量5KD），22 kDa占垂体hGH的70~75%，20 kDa占5~10%（其与受体亲和力较弱），所以产品中22 kDa的GH含量并非100%，相对纯度较低1 * 易受hGH 供体病毒污染 因不断报道因使用hGH 罹患 Creutzfeldt-Jakob disease，于1985年被禁止使用 颜纯、王慕逖小儿内分泌学.2006,92. 192个氨基酸rhGH（ somatrem） 上世纪70年代出现的重组DNA 技术的发展给生长激素的量化供应提供了发展的契机 1981年，Genentech 公司利用E. Coli 包涵体技术研制出含192氨基酸的基因重组人生长激素——Met-rhGH。与天然hGH相比，在N-末端多了一个蛋氨酸残基，又称为somatrem (Protropin?) 缺点 提取和复性工艺复杂 与天然hGH 不完全一致，抗体产生率高，达12~95.5% 1、2、3 Kaplan SL, et al. The Lancet.1986:697-700 Takano K, et al. Acta Paediatr Scand Suppl, 1986,325:19-24. Guy Massa, et al. Clinical Endocrinology (1993) 38, 137-142 191个氨基酸rhGH粉剂(somatropin) 蛋白分泌技术的出现使人们成功表达了与天然hGH 完全一致的rhGH 1987年，含191个氨基酸的rhGH