分支杆菌属细菌检验教学教材演示幻灯片.pptVIP

微生物检验技术;目 录;分枝杆菌属是一类细长略弯曲的，有分枝生长趋势的杆菌。 本属细菌的主要特点是细胞壁含有大量脂质，因此不易着色，若经加热或延长染色时间而着色后能抵抗3%（强脱色剂)盐酸乙醇的脱色，故又称抗酸杆菌。; 缓慢生长菌 迅速生长菌 不能培养菌;;三大传染疾病全球三大传染疾全球疾全球三大传染疾病; 案例;知识链接;一、生物学特性;2.培养特性;脂质：磷脂 索状因子 蜡质D 硫酸脑苷酯 蛋白质 荚膜;2.所致疾病;3.免疫性 ;4、结核菌素试验 结核菌素即结核杆菌蛋白质，目前常用结核菌素制剂是纯蛋白衍生物（PPD） 1）原理：结核菌素试验是应用结核菌素进行皮肤试验来测定机体对结核分枝杆菌是否能引起超敏反应的一种试验 2）试验方法与意义：受试者前臂掌侧皮内注射PPD5U，48～72h后，观察结果。 ;3）结果及意义：红肿硬结超过5mm者为阳性，≥15mm为强阳性，对临床诊断有意义。若PPD-C侧红肿大于BCG-PPD侧为感染。反之，BCG-PPD侧大于PPD-C侧，可能系卡介苗接种所致。 4）用途：①选择卡介苗的接种对象和测定接种效果；②辅助诊断婴幼儿结核病；③在流行病学中，作为调查人群感染结核杆菌的一个指标；④测定肿瘤患者的细胞免疫功能。 ;结核菌素试验;三、微生物检查; 临床标本 　　　　　　　　　　　　　 　涂片检查　　　 　　　分离培养　HPLC　分子鉴定　免疫学鉴定 直接涂片　集菌涂片　　处理标本或无污染标本 染色　　　液体培养基　　 固体培养基　　　　　动物试验 　　　　　　　　　　　　　　　（L-J培养基） 抗酸..　金胺O.. 　　　　　　　　　35℃　　　 　 涂片镜检 　　　　　　　　　仪器培养　　　　　　　　　　 　　 　　　　　　　　　　　　　　　　　＜7天生长　　　＞7天生长 　　　　　　　　　　　　　快速生长菌　　慢生长菌　　　 初步鉴定 　　　　　　　　　　　　　　　　抗酸染色　　　　菌落特点 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　鉴定试验　　　药敏试验;3、检验方法 （1）抗酸染色镜检 1）直接涂片①薄涂片：0.01ml，10mmX10mm,②厚涂片：0.1ml，20mmX15mm 2）集菌涂片：将标本浓集后再涂片，提高阳性检出率①沉淀集菌法；②漂浮集菌法 （2）荧光染色镜检：用金胺O染色，在暗背景下，抗酸杆菌发出荧光（优点：简便、快速、视野覆盖面大和阳性率检出高） ;结核分枝杆菌痰涂片抗酸染色（×1000）;（3）分离培养 1）培养基选择：通常使用的固体培养基有改良罗氏（L-J）培养基、小川培养基、米氏7H10和7H11，液体培养基有米氏7H9和苏通氏培养基。 2）标本的前处理：前处理的目的：一是杀死杂菌，二是液化标本。常见的方法： ①40g/LNaOH法：1份痰+2份40g/LNaOH溶液，35℃水浴消化15-30分钟，震荡2-3次，3000r/min离心15min，弃上清，沉淀物接种 ②4%H2SO4法：多用于尿标本的前处理，1份标本+2-4倍4%H2SO4，室温20min，震荡2-3次，3000r/min离心15min，弃上清，沉淀物接种 ③胰酶-苯扎溴铵法 ;3）接种与培养 取碱处理过的标本，接种于酸性罗氏培养基斜面上 酸处理过的标本则接种在改良罗氏培养基斜面上 4）结果： ①3天内有菌落生长，可报告非分枝杆菌生长。 ②7天内发现菌落生长者，经过抗酸染色证实后可报告快速生长抗酸杆菌。7天以后发现菌落生长者，经过抗酸染色证实后可报告抗酸杆菌生长。 ③满8周后仍未见菌落生长者可报告培养阴性。 （4）鉴定：依据生化反应鉴定 （5）动物实验 （6）其他诊断技术;抗酸染色（×1000）结果报告; 第二节、麻风分枝杆菌 麻风分枝杆菌是麻风病的病原菌。 麻风是一种慢性传染病。 主要表现为皮肤、粘膜和神经末梢的损害。 晚期可侵犯深部组织和器官，形成肉芽肿 ;;;1、形态与染色 较结核杆菌粗而短，抗酸染色阳性，呈束状或团状排列，革兰阳性，无鞭毛、荚膜和芽胞。典型细胞内寄生菌，可形成麻风细胞（即有麻风杆菌存在、呈泡沫状的细胞） 2、培养特性：目前不能人工培养，可用动物犰狳（qiu yu）接种建立模型。 ;二、临床意义;根据临床表现、免疫病理变化和细菌检查结果等将麻风分为瘤型、结核样型、界线综合征两种病型 ;;第三节、非典型分支杆菌 非典型分枝杆菌分为光产色菌（I群）、暗产色菌（II群）、不产色菌（III群）和速生菌（IV群）4群。广泛分布在自然