结核分枝杆菌及其实验室诊断新技术教学教学教材演示幻灯片.pptVIP

郑州大学第一附属医院 郑州大学第一附属医院 结核分枝杆菌及其实验室诊断新技术 赵俊伟（Ph.D, 主管技师） 联系方式：edward35@126.com 郑州大学第一附属医院 检验科 河南省检验医学重点实验室 2015年12月 中国 郑州 结核病又称为痨病和白色瘟疫。 公元三世纪以前，我国古代医学还只是认识到该病可能是一种极为严重的慢性传染病，“累年积月，渐就顿滞，以至于死，死后复转旁人，乃至灭门”。以后逐渐认识到这是一种“肺痨”，其病因为“痨虫”所致。 后来，西方的一些科学家发现这类病人的肺内有一个个坚实的团块，摸上去像土豆或花生这类植物的根上块茎，就将该病称之为Tuberculosis，即结节的意思，这就是结核病命名的由来。 结核病 《红楼梦》：香魂一缕随风散，愁绪??三更入梦遥。 虽然说《红楼梦》与医学无关，但其作者笔下的“痨病”代表林黛玉却惊动全世界。 上世纪50年代，美国细菌学家杜博斯所写的《The White Plague》(白色瘟疫)，就曾提到了林黛玉的肺结核，可见在当时《红楼梦》中林黛玉的病症已是结核病的典型症状。 《黄帝内经素问》：“大骨枯稿，大肉陷下。胸中气满，喘息不便，内痛引肩项，身热，脱肉破腘。” 结核病 2011年全球结核病发病率 （世界卫生组织2012年结核病报告） 结核病目前仍然是一个全球性的严重的公共卫生问题。 结核病 流行过程 传染源 痰涂片阳性的肺结核病人 传播途径 空气传播 易感人群 普遍易感 第二节 流行病特征 影响流行的因素 自然因素 季节、环境、居室通风 社会因素 社会、经济、医疗服务 其他因素 HIV-TB，MDR/XDR-TB 结核病 结核病防控的三大手段 临床诊断常常结合 痰涂片，胸片，症状和体征 结核病 世界防治结核病日 3月24日 结核病是由结核分枝杆菌引起的。。 Robert Koch（1843-1910） 1882年发现结核分枝杆菌，1905年获得诺贝尔生理或医学奖。 Friedrich Neelsen (1854-1898) Franz Ziehl（1857-1926） Ziehl-Neelsen 染色法 （分枝杆菌抗酸染色的基础） 结核分枝杆菌 结核分枝杆菌 （一）生物学性状 1.形态与染色 细长略带弯曲，分枝状，有荚膜，抗酸染色阳性 2. 培养与生长特性 特点 专性需氧 生长缓慢 营养要求高，常用罗氏培养基 生长现象 液体：表面生长（菌膜） 固体：颗粒、结节、花菜状菌落 乳白或米黄，不透明 3. 生化反应 不发酵糖类 ，触酶试验阳性，而热触酶试验阴性 结核分枝杆菌 4. 抵抗力 四不怕 干燥 碱性染料 青霉素等抗生素 对酸或碱有抵抗力 （3% HCl或6% H2SO4、4% NaOH） 四怕 乙醇 湿热 紫外线 抗痨药物 （异烟肼、利福平等） 5. 变异性 形态结构变异： 结核杆菌的L型：颗粒状、丝状 毒力变异： 卡介苗BCG：Calmette和Guérin 牛分枝杆菌 13年230次 耐药性变异： 耐异烟肼及其他抗结核药物的结核菌株日益增多 结核分枝杆菌 实验室诊断新技术 （二）TB-Beads技术 Liu J, Sun ZQ, Pei H, et al. Increased case finding of tuberculosis from sputum and sputum deposits after magnetic bead concentration of mycobacteria. J Microbiol Methods, 2013, 93(2): 144-147. （三）核酸分子诊断技术-Xpert MTB/RIF和TB-SAT 靶基因 菌种鉴定 16SrRNA IS6110 异烟肼 katG、inhA、ahpC、oxyR、KasA、ndh 利福平 rpoB 乙胺丁醇 embB 吡嗪酰胺 pncA 链霉素 rpsL、rrs 喹诺酮类药物 gyrA、gyrB Zhang Y, et al. Nature, 1992, 358(6387): 591-593. Scorpio A, Zhang Y. Nat Med, 1996, 2(6): 662-667. 实验室诊断新技术 基因水平-PCR技术 1. Xpert MTB/RIF Indorsed by WHO in 2010. 实验室诊断新技术 2. TB-SAT技术 Simultaneous Amplification and Testing（RNA仁度）