[理学]第八章 微生物的遗传与变异.pptVIP

3.根据DNA结构改变所造成的遗传信息意义的改变 分： 同义突变 错义突变 无义突变 （一）基因突变 第三节 微生物的变异 一、突变的类型 一个或两个碱基对的突变并不使多肽链上相应的氨基酸发生改变。 碱基对的突变直接影响到多肽链上相应氨基酸的变化。 某个碱基突变造成UAG、UAD和UGA等终止密码子出现，导致多肽链合成终止，使突变失去意义。 （二）染色体畸变 是指不发生染色体数目变化而在染色体上有较大范围结构变化的变异，包括缺失、重复、易位和倒位。 1.易位 2.倒位 3.缺失 第三节 微生物的变异 一、突变的类型 两条非同源染色体之间部分相连的现象。 一个染色体的某一部分以颠倒的顺序出现在原来位置上的现象。 染色体丢掉了某一片段，最终直接影响基因的排列顺序及其相互关系。 二、突变的分子基础 第三节 微生物的变异 （一）自发突变 （二）诱发突变 物理因素：紫外辐射、电离辐射和激光等 化学因素：如碱基结构类似物、与DNA发生化学反应的 诱变剂、移码诱变剂等 吖啶类化合物（如原黄素、吖啶橙、吖啶黄、α氨基吖啶等） ； ICR类化合物（由烷化剂和吖啶化合物相结合而成的化合物）是一类染料 第四节 微生物的遗传重组 遗传重组： 是指将两个具有不同性状的生物细胞中的遗传基因转移到一起，并经过遗传物质的重新组合，形成新遗传型个体的方式。 真核微生物的基因重组：有性杂交、准性杂交等 原核微生物的基因重组：转化、接合和转导等 第四节 微生物的遗传重组 一、转化 第四节 微生物的遗传重组 受体细胞直接吸收了来自供体细胞的DNA片段，并把它整合到自己的基因组中，从而获得了供体细胞部分遗传性状的现象，称为转化。 转化因子 感受态 转化的过程： 一、转化 第四节 微生物的遗传重组 感受态阶段 DNA的摄取和结合 转化DNA的整合 　Ｇ+细菌的转化作用过程 （a）游离DNA与细胞膜上的DNA结合蛋白相结合； （b）核酸酶降解一条DNA单链，另一条单链进入细胞； ( c ) 在RecA蛋白作用下进入的单链与染色体同源区域重组； ( d ) 形成转化子。 二、转导 第四节 微生物的遗传重组 转导是通过噬菌体引起DNA在不同细菌细胞间转移和基因重组现象。 通过噬菌体对寄主细胞任何DNA片段的“错装”，而使寄主细胞获得新的遗传性状的转导，称为普遍性转导。 （一）、普遍性转导 二、转导 第四节 微生物的遗传重组 普遍性转导示意图 （二）特异性转导 二、转导 第四节 微生物的遗传重组 是指某些温和噬菌体，把供体菌的少数特定基因转移到受体菌中，并获得表达的遗传现象。 三、接合 第四节 微生物的遗传重组 接合是通过两个细菌细胞直接接触将DNA从一种细菌转移到另一种细菌。 蛋氨酸、生物素缺陷型菌株（ met- 、bio-） 苏氨酸、亮氨酸缺陷型菌株（ thr- 、leu-） 三、接合 第四节 微生物的遗传重组 F因子 根据F因子在细胞中的有无和存在方式，大肠杆菌分为四中类型： （1）F-菌株 （2）F+菌株 F+×F-→F++ F+ （3）Hfr菌株 游离F因子 非游离F因子 高频重组 （4）F′菌株 F因子的存在方式 第四节 微生物的遗传重组 质粒DNA的接合作用 第五节 重组DNA技术 细胞内发生的基因重组现象，称为体内重组。 由人工操作在细胞外进行DNA重组，称为体外重组。 一、目的基因的克隆 第五节 重组DNA技术 克隆 名词 克隆子 动词 指利用DNA体外重组技术，将一个特定的基因或DNA序列插入到一个载体DNA上，进行扩增。 （一）基因克隆的程序 一、目的基因的克隆 第五节 重组DNA技术 1.目的DNA的分离和合成 2.克隆的载体和外源DNA的连接 3.克隆的基因送入受体细胞 4.特定克隆子的筛选 5.大量扩增含有目的基因的克隆子 （二）基因克隆的载体 一、目的基因的克隆 第五节 重组DNA技术 质粒 二、克隆子的筛选 第五节 重组DNA技术 （一）克隆子的受体 E.coli Bacillus subtilis 酿酒酵母 （二）克隆子的挑选 二、克隆子的筛选 第五节 重组DNA技术 　测定特异蛋白的方法 　采用核酸探针的方法直接搜寻 三、DNA的人工合成和扩增 第五节 重组DNA技术 （一）合成DNA 探针、定点诱变、引物。 （二）DNA的扩增——多聚酶链式反应 三、DNA的人工合成和扩增 第五节 重组DNA技术 PCR的步骤： 1、双链目标DNA热变性； 2、冷却使特定引物同目标DNA结合； 3、DNA多聚酶使引物延长，使目标DNA加倍。 Taq酶、Pfu酶 四、基因的定点诱变 第五节 重组DNA