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全国新课标区模拟精选题:根据高考命题大数据分析,重点关注基础题2,能力题4。
模拟精选题
1.(2016·山东淄博模拟)农杆菌侵染植物细胞后,能将Ti质粒上的T-DNA插入到植物基因组中。图示为利用农杆菌培育转基因植物的基本流程,请据图作答:
(1)剪除Ti质粒的某些片段、替换复制原点O与添加抗生素的抗性基因T的过程①中,需用________处理DNA以防止DNA片段的自身环化,需用________“缝合”双链DNA片段的平末端。
(2)目的基因是指编码蛋白质的结构基因和一些________。由过程②形成的载体中,目的基因的首端具有________识别和结合的部位。
(3)过程③常用____处理使农杆菌成为感受态细胞。在过程⑤⑥前,常采用________技术检测农杆菌和愈伤组织细胞中是否有目的基因及转录产物。
(4)过程④需对植物细胞做冲洗和________处理,然后用_________去除细胞壁。
答案 (1)多种限制酶 T4DNA连接酶 (2)具调控作用的基因 RNA聚合酶 (3)Ca2+(CaCl2溶液) 核酸分子杂交(基因探针)
(4)消毒 纤维素酶和果胶酶
2.(2016·湖北七校联盟)下图是利用牛乳腺生产人生长激素的流程图,回答相关问题。
(1)图中B过程需要________酶。③是________。含有启动子的是________(填“目的基因Ⅰ”或“目的基因Ⅱ”)。
(2)大量扩增目的基因可采用的方法是________。
(3)④为牛的________,b过程常用的方法为________。图示过程中,为使人生长激素基因在牛乳腺细胞中表达,需将该基因与____________等调控组件重组在一起。
(4)检测人生长激素基因在牛的乳腺细胞中是否转录需用____________法。
答案 (1)逆转录 cDNA文库 目的基因Ⅰ (2)PCR技术 (3)受精卵 显微注射法 乳腺蛋白基因的启动子 (4)分子杂交
1.(2016·武汉期末)下图是利用基因工程方法生产重组人生长激素的有关资料。图中质粒表示基因工程中经常用的载体—pBR322质粒,Ampr表示青霉素抗性基因,Tetr表示四环素抗性基因。根据下图回答下列问题(限制酶Pst Ⅰ、EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ切割形成的末端均不相同):
(1)过程②得到的cDNA一般比从基因组文库中获得的目的基因要______________________,过程③需要在目的基因两侧位置上连接Pst Ⅰ和EcoR Ⅰ限制酶识别序列,这样做的目的是_____________________。
(2)如果用限制酶PstⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ对质粒pBR322进行切割,用一种酶、两种酶和三种酶分别切割时,其中含有完整青霉素抗性基因的DNA片段的比例是________。
(3)基因表达载体_____________等(至少答两个)。
(4)如果只用限制酶Pst Ⅰ切割目的基因和质粒pBR322,完成过程④、⑤后,将三角瓶内的大肠杆菌(不含Ampr、Tetr抗性质粒)先接种到甲培养基上,形成菌落后用无菌牙签挑取甲上的单个菌落,分别接种到乙和丙两个培养基的相同位置上,一段时间后,菌落的生长状况如图所示。接种到甲培养基上的目的是筛选________的大肠杆菌,含有目的基因的大肠杆菌在乙、丙培养基上的存活状态分别是________、________。转化后的细胞中是否含有人生长激素基因,也可以用________方法进行检测。
(5)酵母菌细胞也常常作为基因工程的受体细胞,与大肠杆菌等细菌相比,其优点是在蛋白质合成后,细胞可以对其进行________并分泌到细胞外,便于提取。
解析 (1)cDNA一般比从基因组文库中获得的要小的多,原因是其不含内含子,pBR322质粒上有3个酶切位点,但Pst Ⅰ和Hind Ⅲ切割后会破坏2个抗性基因,因此用了Pst Ⅰ就不能用Hind Ⅲ切割,用双酶切的话可以选择EcoR Ⅰ,目的是可以防止质粒和目的基因自身环化。
(2)如果用限制酶Pst Ⅰ、EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ对质粒pBR322进行切割,用一种酶、两种酶和三种酶分别切割时,可以得到9个片段,其中含有其中含有完整青霉素抗性基因的DNA片段是3个,因此其比例是。
(3)基因表达载体除了目的基因和抗性基因外,至少还有复制原点、终止子、启动子等。
(4)如果只用限制酶Pst Ⅰ切割目的基因和质粒pBR322后DNA分子杂交技术来检测。
(5)酵母菌是真核生物,含有内质网和高尔基体等细胞器,可以对蛋白质进行加工和修饰。
答案 (1)不含内含子 避免质粒和目的基因自身环化
(2)1/3 3)复制原点、终止子、启动子等
(4)含四环素抗性基因 在乙中不能存活 在丙中存活 DNA分子杂交 (5)加工(修饰)
2.
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