相同环境下苔藓植物叶绿素及SOD活性.pptVIP

相同环境下苔藓植物叶绿素及SOD活性比较 指导教师：袁志良 姓 名：李畅 专 业：生命科学学院 班 级：2003级2班 一.摘要 以采自郑州郊区的五种苔藓植物为研究对象，通过生物测定的方法分别对其叶绿素含量进行了测定分析，同时对分布区内的两个优势种细叶牛毛藓(Ditrichum pusillum)和灰土扭口藓(Barbula tophacea)的SOD活性进行了测定和比较。结果表明：1.相同环境条件下生长的不同种属的苔藓叶绿素A的含量有明显的差异,基本呈现橙色真藓（Bryum rutilans）＞紫色真藓（Bryum purpurascens）＞灰土扭口藓（Barbula tophacea）＞细叶牛毛藓（Ditrichum pusillum）＞沼生真藓（Bryum knowltonii）；2.叶绿素B含量基本呈现橙色真藓＞紫色真藓＞灰土扭口藓＞沼生真藓＞细叶牛毛藓3.细叶牛毛藓SOD的活性为33毫克/克，灰土扭口藓 SOD酶的活性为88.5毫克/克 。 关键词：苔藓植物；叶绿素含量；SOD活性 二 材料与方法 作者于2007年5月15日在荥阳环翠峪入口处一小瀑布下采集了五种苔藓植物,将其作为实验材料。样本采集后用清水洗净，即刻放入冰盒内，保存一小时后，用剪刀将其叶片迅速剪下，编好号码，放入液氮保存备用。采集的五组样本中，一号和二号样本是采集区的优势种群，也是我省的广布种，作为实验研究的主体，分别做叶绿素含量和过氧化物歧化酶酶活的测定与比较。其他三个样本则分别测出其叶绿素含量，作为对照与一、二号样本进行比较分析。 通过室内标本鉴定，实验样品名称以及对应编号为：1号样本为牛毛藓科(Ditrichaceae)牛毛藓属(Ditrichum)的细叶牛毛藓，2号样本为丛藓科(Pottiaceae)扭口藓属(Barbula)灰土扭口藓，3号样本为真藓科(Bryaceae)真藓属(Bryum)紫色真藓，4号样本为真藓科(Bryum)真藓属(Bryum)沼生真藓，5号样本真藓科(Bryum)真藓属(Bryum)橙色真藓。 三.实验方法 一.叶绿素含量的测定 叶绿素a、b在红光区的最大吸收峰分别为663nm和645nm，可用以下联立方程求叶绿素溶液中的叶绿素a、b的含量。 Ca(mg/L)=12.7D663-2.69D645…………(5) Cb(mg/L)=22.9D645-4.68D663…………(6) 叶绿素总量C(mg/L)=CaCb=20.2D6458.02D663……(7) 把测定的光密度代入上述公式可求出比色杯中的叶绿素含量。如要计算样品中叶绿素含量时，需要考虑稀释因子。 样品中叶绿素含量(mgChl/g鲜重或mgChl/ml叶绿体) D=比色杯中叶绿素含量×稀释倍数/样品量(g鲜重或ml叶绿体) 注意事项 用分光光度法测定物质含量时，分光光度计的波长调节要准确，参比杯与测定杯的透光率要一致。 实验步骤 运用乙醇和丙酮一比一混合的方法来萃取叶绿素，先迅速从液氮中取出鲜叶0.2克，放入预冷的研钵中，并将研钵至于冰上。在其内放入少量石英砂，充分研磨至匀浆。将25毫升乙醇与25毫升丙酮混匀，数次冲洗研钵，将匀浆混同混合液一起倒入小烧杯中，避光放于5度冰箱中，静置数小时，直至烧杯底部残渣呈白色。至此标志萃取完全。然后将一号以及其余四号同时依此处理，编好号码。再用定性滤纸分别对其五个样本进行过滤，注意过滤时要避光，以免叶绿素分解，对试验结果造成影响。将0.5毫升的乙醇和0.5毫升的丙酮混匀，作为紫外分光光度计测量时的空白对照。再将萃取完全的五个样本分别进行在665纳米，645纳米，652纳米处测量。记录测量结果。 叶绿素测量结果记录 各样品叶绿素含量计算结果 叶绿素含量图表分析 叶绿素A的结果分析： 通过以上的测量以及计算，得出的结果如上表上图所示。从结果看出，这五种苔藓植物，在665纳米处的光吸收值呈现出五号＞三号＞二号＞一号＞四号的趋势. 叶绿素a的含量可以作为二氧化硫污染的指示剂，而在本实验中，叶绿素a的含量呈现以上趋势，由此可分析得到，四号样本沼生真蘚对二氧化硫的污染最为敏感，而对二氧化硫抗性最强的是五号样本橙色真藓。 叶绿素B的结果分析 叶绿素b是构成捕光天线复合体LHC的重要组成部分，它不仅具有吸收和传递光能的作用，而且在调控光合机构天线的大小、维持LHC的稳定性及对各种环境的适应等过程中都起作用。当叶绿素b缺失时，不同植物表现出不同的光抑制特性。 因此叶绿素b的含量可作为光和效率高低的一个判断标准，叶绿素b含量高说明其光和效率高，因此有本实验可看出，五号样本橙色真蘚的光和利用效率最高，远远高于其他四个样本。因此样五有较强的光和效率,而光和效率最差的是四