P糖蛋白P glycoprotein，P gp.ppt

P糖蛋白的多药耐药及其逆转06级　生技巩伏雨 关键词 多药耐药 　multidrug resistance,MDR P-糖蛋白　 P-glycoprotein，P-gp 逆 转 reverse P糖蛋白的多药耐药及其逆转 一、MDR概念 二、P-gp的分布、结构和功能 三、P-gp的耐药机制 四、MDR的逆转 一、多药耐药multidrug resistance,MDR 多药耐药（multidrugresistance，MDR）是指一种药物作用于肿瘤细胞使之产生耐药性后，该肿瘤细胞逐渐对未接触过的、结构无关、作用靶点和机制不同的多种抗肿瘤药物也具有交叉耐药性． 二、P-gp的分布、结构和功能 P-gp的分布 在多种组织中： 肠上皮 胆小管 肾近曲小管 血脑屏障 肿瘤细胞 P-gp的结构 　　Pgp是一种相对分子质量为170 ku的单链跨膜糖蛋白, 由1 280个氨基酸组成，与细菌膜转运蛋白具有高度同源性 。是ABC（ATP-binding cassette）转运蛋白超家族成员之一，具有高度保守的ABC结构。每个分子在C端和N端形成两个对称功能区（即两个同源性片断），由中间的连接部分连接。每一同源性片断又含有６个跨膜区和１个ATP结合位点，因此整个Pgp在细胞膜上连续跨膜12次，与细胞形成两个亲水的环状结构。Pgp除２个ATP结合位点外，还具有另外两种类型的结合位点：转运位点（底物结合位点）和调节位点。跨膜区作为膜通道有利于物质转运，ATP结合位点与能量供应有关。 P-gp的功能 　　　Pgp具有广泛的底物特异性，能与多种结构不同的被动扩散到细胞内的药物和有毒性物质结合，依靠ATP的转化能量将到达细胞内的药物和细胞毒性物质泵出，使Pgp在保护正常组织不被毒害同时，将作用于靶点的药物浓度降低． 三、P-gp耐药机制 P-gp是一个ATP依赖性药物外排泵，能利用ATP水解释放的能量主动地将疏水亲脂性药物（秋水仙碱、阿霉素、长春新碱等）转运至细胞外，导致细胞内药物浓度低于杀伤浓度，还可使细胞内药物再分布，致药物集聚于药物作用无关的细胞器如溶酶体内，减少作用靶点部位的药物浓度，从而导致耐药．当药物被P-gp识别并结合后，引起１个ATP结合区活化，水解ATP，P-gp构象改变，以释放底物到膜外侧部分或者是细胞外空间，随后，第２个ATP水解，P-gp恢复到原来的状态，这样P-gp在药物的结合和释放过程中可以循环利用 四、MDR的逆转 免疫治疗 利用特异性抗体封闭P-gp功能 基因治疗 包括单链抗体技术、反义核酸技术、核酶技术和小分子干扰RNA(small in-terfering RNA,siRNA)技术等,在DNA或RNA水平中断MDR1的作用 P-gp抑制药 它们主要通过特异性或竞争性地与P-gp结合来达到逆转目的 （一）免疫治疗 针对MDR的免疫治疗开始于20世纪90年代初,其基本原理是应用P-gp特异性的单克隆抗体与P-gp结合,来影响或阻断P-gp的药物转运功能,阻滞细胞内化疗药物的外流,使之充分发挥其细胞毒作用,从而达到逆转耐药的目的。 到目前为止,采用单克隆抗体或免疫毒素来去除MDR细胞已经成为逆转MDR的重要途径之一。 （二）基因治疗 基因治疗是指在活体将特定的遗传物质导入靶细胞,改变靶细胞的表型或从基因水平替代、阻抑、控制或攻击细胞中有缺陷或有害的基因,以达到预防或改变某一特定疾病状态的目的。 （三） P-gp抑制药 P-gp抑制药是通过抑制P-gp的转运活性从而增加药物在p-gp过度表达的细胞内的积蓄。 （三） P-gp抑制药 P-糖蛋白具有下列特征: (1)P-糖蛋白是ATP依赖性主动排出泵; (2)当细胞内药物浓度达到一定程度时,P-糖蛋白的外排作用可达到饱和状态; (3)P-糖蛋白的底物广泛,包括抗肿瘤药、免疫抑制剂、肾上腺皮质激素、镇痛药、人免疫缺陷病毒蛋白酶抑制剂、细胞因子、止泻药、驱(蠕)虫药、抗痛风药、组胺、钙通道阻滞药、抗癫药、强心苷、某些荧光染料(如Rh-123)、抗抑郁药、抗生素等; (4)底物之间存在相互竞争关系,当2种底物均可与P-糖蛋白竞争性结合时,亲和力大者易于结合被泵出细胞,亲和力小者则在细胞内蓄积。 因此,亲和力大的P-糖蛋白底物能用作P-糖蛋白抑制剂 第1代P-gp抑制药 主要特点　体外可以逆转甚至完全逆转MDR,但在体内不能达到体外有效逆转MDR所需要的浓度。 主要药物　钙离子通道阻滞药:维拉帕米、地尔硫;钙调蛋白阻滞药:氯丙嗪;免疫抑制药:环孢素A(CsA