[理学]第2章 微生物的纯培养和显微技术.pptVIP

第二章 微生物的纯培养和显微技术 本章内容 第一节??微生物的分离和纯培养 第二节??显微镜和显微技术 第三节 显微镜下的微生物 第一节??微生物的分离和纯培养 一、 无菌技术 二、 用固体培养基分离纯培养 三、 用液体培养基分离纯培养 四、 单细胞（孢子）分离 五、 选择培养分离 六、 微生物的保藏技术 一、 无菌技术 在分离、转接及培养纯培养物时防止被其他微生物污染，其自身也不污染操作环境的技术被称为无菌技术。 1. 微生物培养的常用器具及其灭菌 消毒与灭菌 消毒：利用某种方法杀死或灭活物质或物体中所有病原微生物的一种措施，可以起到防止感染或传播的作用。 灭菌：是指利用某种方法杀死物体中包括芽孢在内的所有微生物的一种措施。 防腐：在某些化学物质或物理因子作用下，能防止或抑制微生物生长的一种措施，他能防止食物腐败或其他物质霉变。 灭菌 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 灼烧灭菌 紫外线灭菌 微孔滤膜除菌 干热灭菌 灭菌条件：160 — 170℃；1 — 2 小时 灭菌对象：玻璃器皿 高压蒸汽灭菌 灭菌条件：121℃，15—30分钟 灭菌对象：培养基，玻璃器皿等 灼烧灭菌 将体积较小的金属物品灼烧，以杀死其表面的所有微生物。 紫外线灭菌 利用波长为200—300nm的紫外线杀死微生物。 微孔滤膜除菌 通过机械作用滤去液体或气体中细菌的方法。 2.接种操作 在无菌条件下，用接种环或接种针挑取微生物，把它由一个培养器皿转接到另一个培养器皿中进行培养的操作。 二、 用固体培养基分离纯培养 培养物（culture）：在微生物学中，在人为规定的条件下培养、繁殖得到的微生物群体。 纯培养（pure culture）：只有一种微生物的培养物。 菌落：单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。 平板：冷却凝固后的固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面。 实验室用固体培养基获得微生物纯培养的几种常用方法 涂布平板法 稀释倒平板法 平板划线法 稀释摇管法 涂布平板法 稀释倒平板法 平板划线法 稀释摇管法 培养严格厌氧菌的方法 三、 用液体培养基分离纯培养 稀释法 四、 单细胞（孢子）分离 用来分离纯化个体较大的微生物。 五、 选择培养分离 1.选择平板培养 富集培养 利用不同微生物间生命活动特点的不同，制定特定的环境条件，使仅适应该条件的微生物旺盛生长，从而使其在群落中的数量大大增加。 六、 微生物的保藏技术 微生物保藏的原则： 一定时间内不会死亡； 不会被其他微生物污染； 不会因发生变异而丢失重要的生物学性状。 1.传代保藏 优点：使用方便，成本低 缺点：操作繁琐，易污染，易变异。 2. 冷冻保藏 低温冰箱保存 液氮保存 3. 干燥保存 沙土管保存 冷冻真空保藏 菌种保藏机构 什么是菌落？ 第二节??显微镜和显微技术 一、 显微镜的种类及原理 二、 显微观察样品的制备 一、 显微镜的种类及原理 1. 普通光学显微镜 显微镜的分辨率 能辨别两点之间最小距离的能力 最小可分辨距离=λ/2nsin? 2. 暗视野显微镜 3.倒置显微镜 二、 显微观察样品的制备 显微镜观察样品制作的原则： 1.尽量保持样品结构的完整性和原始性； 2.便于不同显微镜的观察。 光学显微镜的制样 1.活体观察法 1）压滴法 2）悬滴法 3）菌丝埋片法 4）扦片法 5）小室法 悬滴法 菌丝埋片法 扦片法 小室法 2.染色观察 第三节 显微镜下的微生物 一、细菌和古生菌 二、真菌 三、藻类 四、原生动物 一、细菌和古生菌 1.细菌的形态和排列 排列方式 2.古生菌 3.原核生物的细胞大小 二、真菌 1.霉菌 霉菌（mold）是一些“丝状真菌”的统称，不是分类学上的名词。 2.酵母菌 是一群单细胞的真核微生物，无分类学意义。 三、藻类 是指除苔藓植物和维管束植物以外，基本上有叶绿素，可进行光合作用，并伴随放出氧气的一大类真核生物。 四、原生动物 是一类缺少真正细胞壁，细胞通常无色，具有运动能力，并进行吞噬营养的单细胞真核生物。 作业 第二章 微生物的纯培养和显微技术 如果希望从环境中分离得到厌氧固氮菌，你该如何设计实验？ 单个微生物细胞在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度形成肉眼可见、有一定形态结构的字细胞生长群体。 什么是菌苔？ 固体菌落培养基表面众多菌落连成一片时所形成的微生物生长群体。 什么是纯培养？ 由一种微生物组成的细胞群体，通常是由一个单细胞生长、繁殖所形成。 培养皿 三角瓶/锥形瓶 接种环 超净台 高压蒸汽灭菌锅 sin? 细菌染色法 活菌：用美蓝或TTC等作活菌染色 死菌 正染色 负染色：荚膜染色法等 简单染色 鉴别染色 革兰氏染色 抗酸性染色 芽孢染色 姬