超声联合微泡介导缺氧诱导因子1α基因转染293犜细胞的研究.pdfVIP

第 卷 第 期 武汉大学学报 （医学版） Ｖｏｌ．３６Ｎｏ．６ ３６ ６ 　 年 月 ２０１５ １１ ＭｅｄｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌｏｆＷｕｈａｎＵｎｉｖｅｒｓｉｔ Ｎｏｖ．２０１５ ｙ ： ／ 文章编号 （ ） 犇犗犐１０．１４１８８ ．１６７１８８５２．２０１５．０６．０１１ １６７１８８５２２０１５０６０８８７０４ ｊ 　 超声联合微泡介导缺氧诱导因子１α 基因转染２９３犜细胞的实验研究 １ ２ ２ １ １ 吴 田 范 平 杨 聪 陈金玲 郭瑞强 　 　 　 　 　 　 　 １武汉大学人民医院超声影像科 湖北 武汉 ４３００６０ 　 　 　 ２华中科技大学同济医学院附属协和医院 湖北 武汉 ４３００２２ 　 　 　 摘要 目的：探讨超声联合微泡造影剂介导缺氧诱导因子（ ） 基因转染人胚肾 细胞的转染效率。 　 ＨＩＦ１α ２９３Ｔ 方法：将 孔板中的 细胞悬液分为 组， 组：质粒 超声辐照组，加入质粒，终浓度为 ／孔； 组：载基 ６ ２９３Ｔ ３ Ａ ＋ １５μｇ Ｂ 因微泡 超声辐照组，加入载基因质粒微泡混合液，质粒的终浓度为 ／孔，微泡的终浓度为 ／孔； 组：对 ＋ １５ ｇ ２００ ｌ Ｃ μ μ 照组，每孔中仅加入单纯质粒 ，终浓度 ／孔。 组和 组均接受超声辐照，超声照射条件为连续波，声强 ＤＮＡ １５μｇ Ａ Ｂ ／ ２，辐照时间 。超声辐照转染 后，用荧光显微镜和流式细胞仪分别定性定量观察各组细胞基因 １．５Ｗ ｃｍ ３０ｓ ４８ｈ 的转染效率。结果：转染 后，荧光显微镜观察到转染成功的细胞内发出绿色荧光，流式细胞仪检测 组、 组、 ４８ｈ Ａ Ｂ 组的基因转染效率分别为（ ） 、（ ） 、（ ） 。结论：超声辐照联合微泡能够介导治疗 Ｃ ５．６±０．５％ ３０．５±１．０％ ０．１±０．１％ 性基因的体外细胞转染，为冠心病心肌缺血的 ＨＩＦ１α基因治疗奠定基础。 关键词 超声；微泡；基因转染； 　 ＨＩＦ１α 中图分类号 Ｒ５４１．４ 文献标识码 Ａ