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第七章固定化酶immobilizedenzyme

第七章 固定化酶 (Immobilized Enzyme) 酶在水溶液中不稳定,一般不能反复使用,而且不易与产物分离,不利于产物的提纯和精制。 针对这些限制酶广泛应用的因素,将水溶性酶或游离细胞经过化学或物理手段处理,将酶束缚在一定的空间内,限制酶分子在此区间进行活跃的催化作用,成为不溶于水的固定化的酶或细胞。 固定化酶:固定在载体上,并在一定范围内进行催化反应的酶。 一、固定化酶(细胞)的制备方法 (一) 吸附法 (二)包埋法 (三)共价结合(偶联)法 (四)交联法 (五)四种固定化酶制备方法的特点小结 (六)固定化方法与载体的选择 (七)固定化细胞 (八)固定化酶(细胞)应用实例 吸附法 包埋法 共价结合法 交联法 根据吸附剂的特点又分为两种: 物理吸附法(physical adsorption)是通过氢键、疏水键等作用力将酶吸附于不溶性载体的方法。 常用的载体有:高岭土、皂土、硅胶、氧化铝、磷酸钙胶、微空玻璃等无机吸附剂,纤维素、胶原以及火棉胶等有机吸附剂。 离子结合法(ion binding)是指在适宜的pH和离子强度条件下,利用酶的侧链解离基团和离子交换基间的相互作用而达到酶固定化的方法(离子键)。 最常用的交换剂有CM-纤维素、DEAE-纤维素、DEAE-葡聚糖凝胶等;

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