第一章,蛋白质化学.pptVIP

构型（configuration）：是指原子在分子中呈光学不对称排布的一种立体结构，如氨基酸的D型和L型等，只有分子的共价键断裂，才能使一种构型变成另一种构型。 构象（conformation） ：具有相同结构和构型的分子在空间可采取多种形态，分子所采取的特定形态。（以X射线衍射法为主） 3 氨基酸的分类 常见的蛋白质氨基酸、不常见的蛋白质氨基酸、非蛋白氨基酸 必需氨基酸VS非必需氨基酸 注：二十种氨基酸的结构特点 支链氨基酸：缬氨酸、亮氨酸，异亮氨酸 含羟基的氨基酸：丝氨酸、苏氨酸 含硫的氨基酸：半胱氨酸（含巯基）、甲硫氨酸（含硫甲基） 含苯环的氨基酸：苯丙氨酸、色氨酸、酪氨酸 含胍基的氨基酸：精氨酸 含咪唑基的氨基酸：组氨酸 亚氨基酸：脯氨酸 含酰胺的氨基酸：天冬酰胺、谷氨酰胺 含吲哚基的氨基酸：色氨酸 含ε-氨基的氨基酸：赖氨酸 几个结论： 溶液pH pI，AA带正电荷; 溶液pH＝pI，AA不带电荷; 溶液pH pI，AA带负电荷。 AA在pI时，溶解度最小。 AA的pI值是AA的属性，不同的AA由于解离基团的种类、数量、解离程度的不同有不同的pI值，可见在同一pH的溶液中不同的AA由于pI的不同，可带不同的电荷。 AA的pI值大小是由AA分子中可解离基团的pK值大小决定。 3.氨基酸的甲醛滴定 　　用过量的中性甲醛与氨基酸反应，可游离出氢离子，然后用NaOH滴定，从消耗的碱量可以计算出氨基酸的含量。此法称为间接滴定法。 α- 氨基参加的反应 α- 羧基参加的反应 α- 氨基和α-羧基共同参加的反应 侧链R基参加的反应 D. 与亚硝酸反应 现象：生成氮气，用于氨基酸定量测定和蛋白质水解程度的测定。 脱羧基反应 功能团有：羟基、酚基、巯基(包括二硫键)、吲 哚基、咪唑基、胍基、甲硫基、非α- 氨基和非α-羧基等。 谷胱甘肽的生理功用： 1)解毒作用：与毒物或药物结合，消除其毒性作用； 2)参与氧化还原反应：作为重要的还原剂，参与体内多种氧化还原反应； 3)保护巯基酶的活性：使巯基酶的活性基团-SH维持还原状态； 4)维持红细胞膜结构的稳定：消除氧化剂对红细胞膜结构的破坏作用。 －－蛋白质的化学修饰 (4) R基参加的反应 (1)??Millon反应：检测Tyr或含Tyr的蛋白质的反应。 试剂：汞的硝酸盐与亚硝酸盐溶液。产物：红色的化合物。 (2)??Folin反应：检测Tyr或含Tyr的蛋白质的反应。 试剂：磷钼酸、磷钨酸混合溶液。产物：蓝色的钼蓝、钨蓝。 (3)??坂口反应：检测Arg或含Arg的蛋白质的反应。 坂口试剂：α—萘酚的碱性次溴酸钠溶液。产物：砖红色的沉淀。 (4)??Pauly反应：检测His、Tyr及含His、Tyr蛋白质的反应。 试剂：对氨基苯磺酸盐酸溶液、亚硝酸钠、碳酸钠混合溶液 产物：橘红色的化合物。 (5) 乙醛酸的反应：检测Trp或含Trp蛋白质的反应。 当Trp与乙醛酸和浓硫酸在试管中叠加时，产生分层现象，界面出现紫色环。 (6) Cys的反应：Cys或含Cys蛋白质与亚硝基亚铁氰酸钠在稀氨的溶液中，产生一种红色的化合物。 （一） 氨基酸的旋光性 1.不对称碳原子：Thr和Ile有２个手性碳原子。 2.旋光性物质：右旋性（＋）、左旋性（－） 3.光学异构体：有一个不对称碳原子就有2个光学异构体，有两个不对称碳原子就有4个光学异构体。 五、氨基酸的光学活性和光谱性质 （二）氨基酸的光谱性质 1.紫外吸收光谱（200－400） 酪氨酸 ?max＝275nm， 苯丙氨酸 ?max＝257nm， 色氨酸 ?max＝280nm， Ａ：吸光度（Ｅ　消光值） ε: 摩尔消光系数 Ｃ：吸收物质摩尔浓度 Ｌ：吸收物质光径（cm) 2.蛋白质在　280nm　处有最大吸收峰用紫外分光光度计可以测定样品中蛋白质的含量. 分配层析原理（俄国植物学家1903年提出） 　 混合物在层析系统中的分离决定于该混合物的组分在这两相分配系数。 分配定律及分配系数 六 氨基酸混合物的分析分离 　　层析法（也称色谱法）是利用被分离样品混合物中各组分的化学性质的差异，使各组分以不同程度分布在两个相中，这两个相一个为固定相，另一个为流动相。当流动相流进固定相时，由于各组分在两相中的分配情况不同或电荷分布不同或离子亲和力不同等，而以不同的速度前进，从而达到分离的目的。 (一) 纸层析 支持物:层析滤纸,纸上的羟基具有亲水性，因此能吸附一层水作为固定相，而通常有机溶剂作为流动相 。 原理：是根据溶质物质的极性进行分离的。 (二)离子交换层析 原理：分离氨基酸时，用离子交换树脂作为支持物，利用离子交换树脂上的活性基团与溶液中的离子进行交换