核酸的提取及含量的测定eduwest.pptVIP

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  • 2018-03-07 发布于天津
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核酸的提取及含量的测定eduwest

核酸的提取及含量测定 一、核酸提取 ㈠ 原理 ⒈ 破碎细胞: 匀浆、超声震荡、酶解等,因动物组织含有核酸酶,在一定温度下,该酶可被Ca2+,Mg2+等激活,为避免核酸酶对核酸的水解,与核酸提取液中加入适量螯合剂(如EDTA,柠檬酸等),除去这些离子,整个过程在低温下进行。 ㈡ 实验操作 * 核酸是具有重要生物化学功能的生物大分子,根据其分子所含糖的种类不同,核酸分为两大类,含核糖的称为核糖核酸(RNA),含脱氧核糖核酸的称为脱氧核糖核酸(DNA),DNA是遗传信息的携带者,与生物的生长、繁殖、遗传和变异有密切关系,RNA参与蛋白质的生物过程,由于核酸具有如此重要的生物学功能,对核酸的结果与功能的研究已成为当前生物科学的重要课题之一。 ⒉ 提取核糖核蛋白(RNP) 在生物体内核酸多以核蛋白的形式存在于组织中,根据核糖核蛋白(RNP)和脱氧核糖核蛋白(DNP)在不同浓度电解质溶液中溶解度明显差别进行分离。故用0.14mol/LNaCl溶解提取核糖核蛋白。 溶解度大 (比在水中大2倍) 溶解度小 (仅为水中1%) DNP 溶解度小 溶解度大 RNP 1.0mol/LNaCl 0.14mol/LNaCl 核蛋白 此外,两种核蛋白溶解度与pH值有关 RNP:pH2.0-2.5时最低 DNP:pH4.2时溶解度最低 故调节溶液pH也可促

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