[高等教育]电泳技术 生物大分子2.ppt

第二章 分析技术之电泳（第5章） 回顾 什么是电泳？ 什么是毛细管电泳？ 电泳分类？ 毛细管电泳分类？ 电泳和毛细管电泳在应用上有什么区别？ 电泳 带电质点在直流电场作用下，向着其电荷性质相反方向移动。根据带电质点移动速度不同来分离混合物中各组分的分离分析方法称电泳法。 生物化学中许多物质如蛋白质、核苷酸等等，在一定pH值的溶液中都带一定电荷，因而电泳法广泛地用于这些物质的分离与分析中。 电泳技术基本原理 移动方向：带电性质决定 泳动度：带电颗粒在单位电场强度下的移动速度。 μ ＝v/E=(d/t)/(V/l)=(dl)/Vt 影响μ的因素： 1颗粒本身：带电、大小、形状 2 外界因素：电场强度E、pH、离子强度I、电渗、缓冲液粘度及温度等。 电泳装置主要包括两个部分：电源和电泳槽。电源提供直流电，在电泳槽中产生电场，驱动带电分子的迁移。电泳槽可以分为水平式和垂直式两类。 分类：垂直管型盘状电泳、垂直板型电泳； 一、醋酸纤维素薄膜电泳（5节） 醋酸纤维薄膜是一种由醋酸纤维加工制成的一种细密且薄的微孔膜。广泛应用于医学临床中各种生物分子的分离分析中，如血清蛋白、血红蛋白、球蛋白、脂蛋白、糖蛋白、甲胎蛋白、类固醇及同工酶等。它具有简单快速等优点，电渗作用虽然较高但很均一 ，不影响样品的分离效果。不足之处是分辨率比聚丙烯酰胺凝胶电泳低，由于薄膜厚度小（约10～100μm），样品