总氮量的测定——凯氏micro—kjeldahl定氮法.doc

实验一 总氮量的测定——凯氏(Micro—Kjeldahl)定氮法 一、目的 学习凯氏定氮法的原理和操作技术。 二、原理 常用凯氏定氮法测定天然有机物(如蛋白质、核酸及氨基酸等)的含氮量。 含氮的有机物与浓硫酸共热时，其中的碳、氢2元素被氧化成二氧化碳和水，而氮则转变成氨，并进一步与硫酸作用生成硫酸铵。此过程通常称为“消化”。但是，这个反应进行得比较缓慢，通常需要加入硫酸钾或硫酸钠以提高反应液的沸点，并加入硫酸铜作为催化剂，以促进反应的进行。甘氨酸的消化过程可表示如下： CH2NH2COOH+3H2SO4，一2CO2+3SO2十4H2O十NH3 2NH3+H2SO4一(NH4)2SO4 浓碱可使消化液中的硫酸铵分解，游离出氨，借水蒸汽将产生的氨蒸馏到一定量、一定浓度的硼酸溶液中，硼酸吸收氨后使溶液中的氢离子浓度降低，然后用标准无机酸滴定，直至恢复溶液中原来的氢离子浓度为止，最后根据所用标准酸的摩尔数(相当于待测物中氨的摩尔数)计算出待测物中的总氮量。 三、试剂 1、消化液(过氧化氢：浓硫酸 ：= 3：2：1) 200mL 2、粉末硫酸钾—硫酸铜混合物 16g K2S04与CuS04·5H201~2 3：1配比研磨混合 3、30％氢氧化钠溶液 1 000 mL