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产自嗜热脂肪芽孢杆菌（NCIM-5146）的热稳定α-半乳糖苷酶的纯化、特性表征及其底物专一性研究 摘要：采用色谱分析法，使用苯基琼脂糖凝胶4B柱，纯化嗜热脂肪芽孢杆菌（NCIM-5246）产的一种胞外热稳定α-半乳糖苷酶，获得纯组分。此酶的比活力从1.03U/mg蛋白增长到400U/mg蛋白，大约增长了389倍。采用SDS电泳Da、165.9kDa，因此推测有二聚特性。纯化的α-半乳糖苷酶是一种非糖基化蛋白，其等电点是4.9。纯化的酶的最适pH和最适温度，分别是6.5-7.0和65℃。α-半乳糖苷酶能在较广的pH范围内（3～9）保持稳定，在70℃下，失活半衰期是30分钟。 此α-半乳糖苷酶的部分N末端序列与先前报导的嗜热脂肪芽孢杆菌（NUB3621）产的α-半乳糖苷酶表现出显著的同源性（相似度达80%）。用圆二色谱法（CD）测定酶的二级结构，表现出α/β蛋白结构，并且温度处在转变温度上下时，其构想形式减少。纯化的酶与对阿仑尼乌斯阿仑尼乌斯 关键词：嗜热脂肪芽孢杆菌（NCIM-5146）；α-半乳糖苷酶；热稳定性酶；纯化；二级结构 前言 α-半乳糖苷酶（α-D-半乳糖苷酶 galactohydrolase E.C.3.2.1.22）是一种外切糖苷酶，主要是切断各种底物中的末端α-1-6-D-半乳糖残基，包括棉籽糖族的寡糖：棉籽糖、水苏糖、蜜二糖、毛蕊花糖和多聚糖：半乳甘露聚糖、