DNA聚合酶目的基因.pptVIP

基因工程的基本内容 基因决定性状（一） 青霉菌能产生对人类有用的抗生素——青霉素 基因决定性状（二） 家蚕能够吐出蚕丝为人类利用 基因决定性状（三） 豆科植物的根瘤能够固定空气中的氮 定向基因改造设想 基因工程概念 基因工程：在生物体外，通过对DNA分子进行人工“剪切”和“拼接”，对生物的基因进行改造和重新组合，然后导入受体细胞进行无性繁殖，使重组基因在受体细胞内表达，产生出所需要的基因产物。 基因操作的工具 基因工程过程示意图 限制性内切酶 分布：主要在微生物中。 特点：特异性，即识别特定核苷酸序列， 切割特定切点。 结果：产生黏性未端（碱基互补配对）。 举例：大肠杆菌的一种限制酶能识别 GAATTC序列，并在G和A之间切开。 DNA连接酶 连接酶的作用：将互补配对的两个黏性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子。 连接的部位：磷酸二酯键，不是氢键。 DNA连接酶的作用过程 运载体 作用：将外源基因送入受体细胞。 条件： 能在宿主细胞内复制并稳定地保存。 具有多个限制酶切点。 具有某些标记基因 种类：质粒、噬菌体和动植物病毒。 质粒的特点 基因操作的基本步骤 提取目的基因 将需要的基因从供体生物的细胞内提取出来。 提取目的基因的方法（一） 直接分离基因——鸟枪法 提取目的基因的方法（二） 人工基因合成法 目的基因与运载体结合 将目的基因导入受体细胞并扩增 目的基因的检测和表达（一） 为保证目的基因得到有效利用，通常用大量的受体细胞来接受不多的目的基因。 目的基因的检测和表达（二） DNA连接酶的作用原理 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切割点上将DNA 分子切断。目前已发现的限制酶有200多种。 DNA连接酶的作用过程 质 粒 质粒的特点 细胞染色体外能自主复制的小型环状DNA分子； 质粒是基因工程中最常用的运载体； 最常用的质粒是大肠杆菌的质粒； 存在于许多细菌及酵母菌等生物中； 质粒的存在对宿主细胞无影响； 质粒的复制只能在宿主细胞内完成。 小 结 日本科学家近日发现，寄生在昆虫体内的细菌基因可进入寄主昆虫的细胞核，并通过寄主昆虫把细菌基因遗传下去。这一发现有可能使人们重新认识生物进化论学说，高度警惕转基因技术的风险。包括人类在内，各种生物的染色体内都有可能汲取了寄生或共生在生物体内的微生物的基因。不同种类生物之间转基因现象范围不断扩大的事实，对了解生物进化的原因和病原体相互作用原理将大有帮助。同时也向人类发出警告：转基因技术存在风险，导入基因有可能扩散到其它生物。 生物安全的特点：转基因生物体对人类和环境的影响是长期的，不可预见的，很多影响可能产生滞时效应，不像非生物影响那样随时间而减小，随距离而减弱，大量的转基因生物是以特殊的生命形式，以超过自然进化千百倍的速度介入到自然界来，潜在的危险可能会更大。 back 主 页 返 回 返 回 返 回 返 回 * Gene engineering 设想一 能否让禾本科的植物也能够固定空气中的氮？ 能否让细菌“吐出”蚕丝？ 设想二 能否让微生物产生出人的胰岛素、干扰素等珍贵的药物？ 设想三 经过多年的努力，科学家于20世纪70年代创立了可以定向改造生物的新技术——基因工程。 基因对性状的控制 1.通过控制蛋白质分子的结构来影响性状 2.通过控制酶的合成来控制代谢过程，从 而控制生物性状 蛋白质 DNA mRNA 定向改造生物的依据 人类需要的基因产物 结果 剪切→拼接→导入→表达 基本过程 DNA分子水平 操作水平 基 因 操作对象 生物体外 操作环境 基因拼接技术或DNA重组技术 基因工程的别名 基因的剪刀——限制性内切酶 基因工程过程示意图 基因的针线——DNA连接酶 基因的运输工具——运载体 ①从细胞中分离出DNA ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ②限制酶截取DNA片断 ③分离大肠杆菌中的质粒 ④ DNA重组 ⑤用重组质粒转化大肠杆菌 ⑥培养大肠杆菌克隆大量基因 返 回 返 回 返 回 　　能将外源基因送入受体细胞的工具就是运载体。 返 回 提取目的基因 目的基因与运载体结合 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测和表达一 目的基因的检测和表达二 取 出DNA 用限制酶切断DNA 目前被较广泛提取使用的目的基因有：苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。 返 回 将供体生物的DNA用限制酶切割为许多片段，再用运载体将这些片段都运载到受体生物的不同细胞中去。只要有一个细胞获得了需要的目的基因并得以表达，基因工程就算成功了。　　该法最大的缺点是带有很大的盲目性，工作量大，成功率低。且不能将真核生物的基因转移到原核生物中去。 用限制酶切