一株蜂粮源拮抗细菌的分离鉴定及其抑菌物质特性-微生物学报.PDFVIP

微生物学通报 Oct. 20, 2016, 43(10): 2197−2206 Microbiology China /wswxtbcn tongbao@ DOI: 10.13344/j.microbiol.china.150857 研究报告 一株蜂粮源拮抗细菌的分离鉴定及其抑菌物质特性 * 申光辉 冯孟 张志清 黎杉珊 秦文 刘书亮 ( 625014) 摘 要：【目的】为发掘和利用蜂粮中拮抗菌资源，对分离获得的拮抗细菌菌株PC2 进行分类 鉴定，并测定其发酵液抑菌物质基本特性。【方法】采用改良牛津杯双层平板法测定菌株发酵 液抑菌谱及温度、pH 、紫外线和蛋白酶对其抑菌活性稳定性的影响，菌株鉴定结合形态学、生 理生化特征和 16S rRNA 基因序列分析，硫酸铵沉淀法和盐酸沉淀有机溶剂提取法进行抑菌活 性物质的初步分离。【结果】从3 种蜂粮中分离筛选得到 17 株拮抗菌株，其中 1 株细菌 PC2 以马铃薯葡萄糖液体培养基发酵制备的无菌发酵液对7 种供试菌株具有较强抑制作用，经形态、 生理生化特征及 16S rRNA 基因序列分析，将其初步鉴定为解淀粉芽胞杆菌(Bacillus amyloliquefaciens) 。菌株发酵液抑菌活性对温度、酸和紫外线具有较强的稳定性，对蛋白酶K 、 胃蛋白酶、碱性蛋白酶处理敏感。菌株发酵液存在抑菌蛋白和脂肽类物质。【结论】菌株PC2 在食品保鲜和农业生防中具有潜在的开发应用价值。 关键词：蜂粮，解淀粉芽胞杆菌，抑菌活性，稳定性 Isolation, identification of an antagonistic bacteria from bee bread and characteristics of antimicrobial substances * SHEN Guang-Hui FENG Meng ZHANG Zhi-Qing LI Shan-Shan QIN Wen LIU Shu-Liang (College of Food Science, Sichuan Agricultural University, Ya’an, Sichuan 625014, China) Abstract: [Objective] To explore potent antagonistic microorganisms in bee bread, an antagonistic strain PC2 isolated from bee bread was identified, and its antimicrobial characteristics were evaluated. [Methods] Antagonistic spectrum and effect of thermal, pH, UV irradiation and protease on fermentation broth inhibitory activity were assessed by Oxford cup plate assay; strain identification was based on morphology, physiological and biochemical characteristics and 16S rRNA gene sequence analysis. The antimicrobial protein