基因选殖与重组蛋白的生产.PDFVIP

基因選殖與重組蛋白的生產 吳彰哲 (Chang-Jer Wu) Department of Food Science National Taiwan Ocean University 基因選殖的基本流程 質體 (plasmid) 複製原ori – 才能在細菌中大量 複製 耐抗生素基因– 以利選殖出帶 有此質體的細菌株 選殖位置 (mutiple cloning sites) –供選殖基因接入的位置 vector Foreign gene 1 基因選殖的基本流程 限制酶 (restriction enzyme) Sticky end Blunt end 接合酶(ligase)及其他特別的酵素 A. Sticking end ligation B. Blunt end ligation C. Tailing method GGG CCC D. Linker method 勝任細胞(competent cell) –足以勝任接受 外來質體的細胞 2 3 質體 原生質體所帶的基因 複製原起點(replication origin) 及複製力 4 抗藥性基因 載體的種類 5 載體(vector) MCS pCMV BGH pA f1 ori SV40 ori pcDNA3 5446 bp Amp r Neo SV40 pA ColE1