应用免疫比浊法在离心式分析仪上测定转铁蛋白的实验探讨.PDFVIP

维普资讯 上海医学检验杂志l989年第4卷第3期 应用免疫 比浊法在离心式分析仪上测定 转铁蛋 白的实验探讨 上海市第一人 民医院检验科 吴文傻 谢松业 内窖撮摹 本文建立了在 ENCORE离心式舒折仪上按仪器原编程序用国产 自配试剂铡定 T￡的免疫 比浊 方法．随后应用于 I吕G、 A、IgM 等侧定亦获得满意结果．作者发现．除市售抗血清的纯度和效债直接影响 测定灵敏度，必要时须作纯化处理外．缓冲稀释液以含有 PEG 600048g／L．NaCI ／L的0．01meI，Lp田 ．2 PB较为适宜．抗血靖应用}蓖的稀释度匝按每批抗血清的实际救价滴定结果来选定．用本法涮 定 Tf的盛性范 围至步可选 9．0g／L．回收率为 101．3 ．批 间 CV5 ．与国外同类进 口试剂平行检铡 4o份 不 同 1 含量 (0．467--7．7~／L)标本结果无差 异 (t—1．129．P0．o5)相关良好 (r一0．998．回归方程 ，罱O．995x+ 0．0姐)． 七十年代以来 ，国外 已将特殊蛋亩的免 祥品：病人的血清 疫 比浊法应用离心式 自动 分 析 仪，来测定 五、仪器 ：美 国Baker公司生产ENCORE ① @ ，用此类仪器测定特殊蛋 白，具有简便 、 离心式 自动分析仪。 快速、灵敏、准确性、精密性高和试剂、样 方法 全部按照ENCORE~样器和分析 品用量少等优点。特剐适宜于批量标本 的检 软盘原编参数和程序。 测。美国Baker公司生产~ENCORE 就是 一 、 试剂和样 品准备 此类仪器 之一。该仪器操作虽然简单，但试 1． 抗血请应用液：临用前取一定量抗 剂要求较高 。为了应用 国产试剂开展这一方 血清，先用适量生理盐水 (Ns)稀 释，再用 面 的工作 ，推动免疫测定技术 向 自动 化发 缓冲稀释液作 1：10稀释，使其最终稀释度与 展，我们参照有关资料，通过实验探讨首先 抗血请标定的稀释度一致。 建立了用国产 自配试剂测定血 清 转 铁 蛋 白 2． 定标液：临用前用N．s将 已重溶 的 (Transferrin，Tf)的免疫 比浊法，并对其使 Tf、IgG、IgA、IgM参考品稀 释配制成相应 用性能作了分析和评价。随后，应用于 IgG、 的五个不 同浓度定标液。 IgA、IgM等测定 ，亦获得了同样满意 的结果。 3． 样品，测定前所有 样 品 包 括定标 液，质控液均用N．s作1：25稀 释备用。 材料和方法 二、主要测定参数：样 品8pl，稀释水 材料 5O山抗血清应用液 250山，T30℃， 292nn~ 一 、 羊抗人Tf、IgG、IgA、IgM血请及 很 匀时间 1．6秒，空 白时间6秒，起 始读数 其相应参考品：均 由上海生物制 品研究所提 时间9O秒，窗时问1O秒 ，终止时间360秒，线 供。 性 限值 0，15毫吸光单位 (MA)，吸光度 临界 二、缓冲稀释液：NaCI9．0g，聚 乙二醇 值 3，5 。 (PEG)分子量600048g加pH7，2，0．0lmol／L 三 、结果计算t由仪器微机 自动将样 品 磷酸缓冲液 (PB)至 1升。 测得的吸光度，通过五点定标并经三阶多项 三、同类配套进 口试剂；由Baker公司