免疫组织化学(一).pptVIP

免疫组织化学 实验技术 免疫组织化学的定义 免疫组织化学（immunohistochemistry, IHC）技术是应用免疫学基本原理——抗原抗体反应，对组织或细胞内抗原或抗体物质定性和定位的组织化学技术。 定性与定位 免疫组织化学的分类 免疫荧光法 免疫酶法 免疫胶体金法等 实验所用标本 组织标本 石蜡切片 冰冻切片 病理切片 组织芯片 石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法，对于组织形态保存好，且能作连续切片，有利于各种染色对照观察；还能长期存档，供回顾性研究 实验所用抗体 单克隆抗体：一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体，应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。 多克隆抗体：将纯化后的抗原直接免疫动物后，从动物血中所获得的免疫血清，是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。 酶联免疫组织化学 三步法 二步法 荧光标记免疫组织化学 常用染色方法 SP法 SP法检测ERalpha在绵羊输出管中的分布 酶标二步法 免疫荧光（FITC）检测垂体中LH 免疫荧光法（TRITC）检测PRL 组织切片脱蜡水化 二甲苯，10min?2 无水乙醇，5min 90%乙醇，5min 80%乙醇，5min 70%乙醇，5min 蒸馏水， 5min 1. 脱蜡和水化 免疫组织化学步骤 抗原修复