第04章-DNA损伤和修复.pptVIP

一、DNA损伤与肿瘤 ●产生肿瘤的原因 DNA损伤可导致原癌基因的激活和抑癌基因失活，导致细胞恶变 ●产生的典型肿瘤 人类遗传性非息肉性结肠癌 家族遗传性乳腺癌和卵巢癌 二、 DNA损伤修复缺陷导致遗传疾病 1.DNA修复缺陷导致的人类遗传病 ● 着色性干皮病（XP） DNA损伤修复缺陷造成的一种遗传病，对该病研究，发现一些与切除损伤部位有关的XP蛋白缺失 2.细胞对DNA损伤应答缺陷 一种常染色体隐性遗传病，发病率在十万分之一至数十万分之一。主要影响机体的神经系统、免疫系统和皮肤 ● 共济失调-毛细血管扩张症 DNA损伤修复的不同层面 ● DNA复制时校对功能将损伤几率降至极低 ● 单碱基损伤、单链断裂时靠回复修复、切除 修复、错配修复等机制修复 ● 复杂损伤靠重组修复、SOS修复完成，但此 时为不精确修复易产生突变 ● 损伤程度到了无法修复时，细胞发生凋亡 DNA损伤与修复知识点一览图 * * * * （二） 切除修复 ●定义 在多种酶的作用下，先将损伤区域切除，然后利用互补链为模板，合成一段正确配对的碱基顺序来修补 ●切除过程 ●切除方式 碱基切除修复、核苷酸切除修复 识别并切除→修复合成并连接 2.1碱基切除修复（base-excision repair, BER） 所有细胞中都带有能识别受损核酸位点的糖苷水解酶，它能特异性切除受损核苷酸上的N-β－糖苷键，在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶位点（AP位点）。 DNA分子中一旦产生了AP位点，AP核酸内切酶就会把受损核苷酸的糖苷-磷酸键切开，并移去包括AP位点核苷酸在内的小片段DNA，由DNA聚合酶I合成新的片段，最终由DNA连接酶把两者连成新的被修复的DNA链→碱基切除修复(base-excision repair)。 .糖甘水解酶识别改变了的碱基，把碱基从N-β-糖苷键处切下来，在DNA链上形成去嘌呤或去嘧啶位点，统称为AP位点。 由AP磷酸内切酶将受损核甘酸的糖苷-磷酸键切开 5‘ 3‘ DNA连接酶连接 利用DNA聚合酶I在切除损伤部位，补上核苷酸 * * 2.2核苷酸切除修复（Nucleotide excision repair, NER） 是机体正常细胞针对DNA链上较大损伤的修复过程，它由多种DNA修复酶组成。 2.2核苷酸切除修复（Nucleotide excision repair, NER） 损伤发生后，首先由DNA切割酶(excinuclease)在己损伤的核苷酸5’和3’位分别切开磷酸二酯键， 产生一个由12～13个核苷酸(原核生物)或27～29个核苷酸(人类或其他高等真核生物)的小片段， 移去小片段后由DNA聚合酶Ⅰ(原核)或ε（真核)合成新的片段，并由DNA连接酶完成修复中的最后一道工序。 识别损伤部位 损伤的两边切除几个核苷酸 DNA 聚合酶以母链为模板复制合成新子链 DNA连接酶将切口补平 ● 核苷酸切除 被切除的不是单个碱基，而是一段寡核苷酸。是细胞内更为重要的一种修复方式 ● 切除修复的特点 是DNA修复的一种普遍形式 （三） 重组修复 ●定义 重组酶系将未受损伤的DNA?片段移到损伤部位， 提供正确的模板，进行修复 ●分类 ? ● 同源性重组 两段双链DNA同源性大于200 bp，大肠杆菌及酵母中Rec A蛋白、人细胞中Rad51是关键 ●非同源性重组 同源性低，DNA双链断裂的主要修复方式，关键分子是DNA-PK及XRCC4，非精确修复 * * 复制中出现损伤 重组修复 DNA聚合酶填补缺损 * * 3、错配修复（mismatch repair，MMR） DNA 错配修复是细胞复制后的一种修复机制, 具有维持DNA 复制保真度, 控制基因变异的作用。 错配修复实际上是一种特殊的核苷酸切除修复，它专门用来修复在DNA复制中出现的新合成DNA链上的错配的碱基。但如何避免将DNA链上正确的碱基切除呢？这就需要将old strand 和new strand区分开来。 原核生物利用甲基化区分old strand 和new strand，因此原核细胞中的错配修复也称甲基化指导的错配修复（methyl-directed mismatch repair）。 错配修复系统识别母链靠Dam甲基化酶（Dam methylase），它能使位于5’GATC序列中A的N6位甲基化。一旦复制叉通过复制起始位点，母链就会在开始DNA合成前的一小点时间（几秒钟至几分钟）内被甲基化。刚合成的DNA新链上的GATC序列还没有来得及甲基化，而作为模板的old strand早已被甲基化了，利用这种差别区分old s