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- 2018-03-09 发布于河南
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MouseIL-10quantikineprotocol中文说明书
小鼠白介素-10说明书
样品收集和储存:
细胞培养上清液:离心除去沉淀,马上检测或分成几份在-20℃储存。避免反复冻融。
注:严重溶血或高血脂样品不适合用此方法测定。
样品准备:
鼠血清样品用校准稀释剂RD5T2倍稀释。建议:75μl样品+μlRD5T。
试剂制备:
使用前把所有试剂放置至室温。
小鼠白介素-10试剂对照品:用去离子水或蒸馏水1.0ml重组试剂盒。测定未稀释的对照品。
浓缩洗涤液:如果有晶体析出,加热至室温,轻轻搅拌至晶体完全溶解。25ml浓缩洗涤液用去离子水或蒸馏水稀释至625ml。
底物工作液:显色剂A和B等体积混和,15分钟内使用。避光。每孔需要100μl混合的显色剂。
小鼠白介素-4标准品:用5.0ml校准稀释剂RD5T重组小鼠白介素-10标准品。不能混用不同批次的试剂。得到1000pg/ml的母液。可以把标准品放置5分钟并轻轻搅拌至溶解。
每个试管加200μlRD5T。用母液配制稀释液(如下图)。每管在下次转移前都要充分混匀。未稀释的小鼠白介素-10标准品作为高浓度标准品(1000pg/ml)。RD5T作为0浓度标准品(0pg/ml)。
检测程序:
所有的试剂和样品使用前放置至室温。建议所有的样品、试剂、对照品要重复检测。
1.按上一节的方法准备好试剂,稀释的标准品和样品。
2.从板的框架中拿走多余的板条,把它们放回有干燥剂的箔袋,密封。
3.每孔
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