[高二理化生]wp基因工程的基本操作程序.pptVIP

1.2 基因工程的基本操作程序 某一生物的全部基因 问题1、你能推出由mRNA反转录形成的cDNA的过程大致分为哪些步骤吗？ 2、PCR技术的基本原理： 原理：DNA复制(体外) 3、人工合成 根据已知蛋白质的氨基酸序列，你能通过DNA合成仪用化学方法直接进行人工合成吗？ 问题3、将生物的所有DNA直接导入受体细胞不是更简便吗？如果这样做，结果会怎么样？ 不是。 这种方法的针对性差，全靠运气，也无法确定什么基因导入了受体细胞. 3、过程： 4、产物： 有关基因工程的叙述正确的是 （ ） 　A、限制酶只在获得目的基因时才用 　B、重组质粒的形成在细胞内完成 　C、质粒都可作为运载体 　D、蛋白质的结构可为合成目的基因提供资料 三、将目的基因导入受体细胞（转化） 转化——目的基因进入受体细胞中，并 在受体细胞中维持稳定各表达过程。 采用基因工程的方法培养抗虫棉，下列导入目的基因的做法正确的是（ ） ①将毒素蛋白注射到棉受精卵中 ②将编码毒素蛋白的DNA序列注射到棉受精卵中 ③将编码毒素蛋白的DNA序列与质粒重组导入细菌，用该细菌感染棉花体细胞，再进行组培 ④将编码毒素蛋白的DNA序列与质粒重组，注射到棉花子房，并进入受精卵 A.①② B.②③ C.③④ D.④① 四、目的基因的检测与鉴定 一、个体生物学水平的鉴定 二、分子水平的检测 1、检测转基因生物染色体的DNA 是否插入目的基因。（导入检测） DNA分子杂交技术：DNA---DNA 2、检测目的基因是否转录出mRNA（转录检测） 分子杂交技术：DNA---mRNA 3、检测目的基因是否翻译成蛋白质（翻译检测） 抗原—抗体杂交：蛋白质--蛋白质 科学家通过基因工程方法，将苏云金芽孢杆菌的Bt毒蛋白基因转入普通棉株细胞内，并成功实现了?表达，从而培育出了能抗棉铃虫的棉花植株──抗虫棉。其过程大致如图所示： 1）进行基因工程操作的工具酶有 2)上述过程中，将目的基因导入棉花细胞内使用的方法是 ，这种导入方法较经济、有效。目的基因能否在棉株体内稳定维持和表达其遗传特性的关键是目的基因是否插入到受体细胞染色体?DNA上,检测采用的最好方法是 。 3)抗虫棉的培育过程中，抗虫基因的受体细胞可以是棉花的一般体细胞，原因是 。?最后检验培育的棉花是否抗虫，常用的方法是: Ti质粒 T-DNA 携带外源基 因的DNA 构建表 达载体 含目的基因 的重组Ti质粒 转入农 杆菌 导入植 物细胞 植物细胞 将目的基因插入 染色体的DNA中 组培再生 成植株 表现出新性 状的植株 跟踪训练 C 2、将目的基因导入动物细胞： 显微注射法(导入受精卵） 3、将目的基因导入微生物细胞 受体细胞 感受态 细胞 Ca2+ 感受态细胞 吸收DNA分子 含重组表达DNA分子的缓冲液 …ATAGCATGCTATCCATGAATTCGGCATAC… 含有目的基因的基因片段 …***CGATAGG… 基因探针 放射性标记 …TATCGTACGATAGGTACTTAAGCCGTATG… 基因探针（可以是目的基因的一条链） 基因工程的基本操作程序包括了 目的基因的获取 基因表达载体的构建 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测与鉴定 小结： 1、正确表示基因操作“四步曲”的是（ ） ①提取目的基因 ②目的基因导入受体细胞 ③目的基因与运载体的结合 ④目的基因的检测和表达 A.①②③④ B.④①③② C.①③②④ D.③①②④ C 闯关练习 2、有关基因工程的叙述中，错误的是（ ） A、DNA连接酶将黏性末端的碱基对连接起来 B、 限制酶用于目的基因的获得 C、目的基因须由运载体导入受体细胞 D、 人工合成目的基因不用限制性内切酶 A 闯关练习 3.切取牛的生长激素和人的生长激素基因，用显微注射技术将它们分别注入小鼠的受精卵中，从而获得了“超级鼠”此项技术遵循的原理是 （ ） 　A.基因突变 DNA→RNA→蛋白质 B.基因工程 RNA→RNA→蛋白质 　C.细胞工程 DNA→RNA→蛋白质