微生物学检验沙门氏菌属参考.pptVIP

肠道杆菌 沙门菌属 沙门菌属 是寄生于人类和动物肠道中，生物学性状相似的革兰阴性杆菌 形态染色 革兰阴性杆菌，无芽孢、无荚膜、有周鞭毛，多数菌株有菌毛 沙门菌 培养特性 兼性厌氧、营养要求不高 在肠道选择培养基上呈无色半透明S型菌落菌落，与志贺菌菌落相似。 SS平板－－无色菌落，产H2S菌株，菌落中心呈黑色 　Mac平板－－无色菌落 　EMB平板－－无色菌落 生化反应 氧化酶试验（－） 分解葡萄糖、不分解乳糖 KIA：KA＋＋（伤寒沙门菌产酸不产气KA－＋） MIU：＋ － － IMViC：－＋ － ＋ 赖氨酸脱羧、鸟氨酸脱羧：＋ 抗原结构 O抗原：化学成分为脂多糖；耐热；与相应抗体结合出现颗粒状凝集；沙门菌分群依据。 H抗原：化学成分为蛋白质；不耐热；与相应抗体结合出现絮状凝集；沙门菌分型依据。 Vi抗原：位于菌体外层；抗原性强，相应抗体可作为筛选带菌者指标；不耐热；能阻止O抗原与相应抗体结合；伤寒沙门菌和丙型副伤寒沙门菌有Vi抗原，有V－W变异。 几种沙门菌的抗原组分 变异性 S-R变异： H-O变异： V-W变异： 相位变异： 耐药性变异： 抵抗力 对理化因素抵抗力弱 尤其对酸敏感 对消毒剂敏感 易产生耐药性 临床意义 致病物质：菌毛、内毒素、Vi抗原 所致疾病： ◆肠热症 ◆食物中毒 ◆败血症 ◆慢性肠炎 免疫性：病后免疫力牢固，以细胞免疫为主 肠热症发病过程 沙门菌感染的预防 加强饮食卫生，切断传播途径 发现并及时隔离病人 接种伤寒和副伤寒沙门菌疫苗进行特异性预防 微生物学检验 标本采集：根据不同疾病采集不同标本 肠热症的标本采集 　　※发病第1～2周：血液 　　※发病第2～3周：粪便、尿液 　　※肠热症全程：骨髓 检验程序 检验方法－－培养 血液、骨髓：将待检标本接种胆盐葡萄糖肉汤增菌培养，每日观察，出现浑浊等现象，及时转种 血平板和肠道选择平板。 粪便：接种SS、Mac或EMB分离培养，若标本含菌量少，可先增菌。 尿液：尿液离心后，取沉淀物接种血平板和肠道选择平板。 检验方法－－生化反应初步鉴定 触酶＋、氧化酶－、硝酸盐还原＋ 苯丙氨酸－、葡萄糖酸盐－ KIA：K A +/- +/- MIU：＋－－ 赖氨酸脱羧＋、鸟氨酸脱羧＋ 检验方法－－血清学鉴定 首先用A-F多价O诊断血清进行初步鉴定； 再用O因子血清鉴定到群（A、B、C、D、E、F群）； 再用H因子第2相血清辅助鉴定型； 若生化反应符合沙门菌，A-F诊断血清不凝集，应考虑是否有Vi抗原，将待检菌液加热后，再进行A-F多价O血清凝集试验。 沙门菌鉴定需注意的问题 玻片凝集试验需注意菌液浓度、反应温度 生化反应符合，玻片凝集试验阴性，应考虑是否有Vi抗原的存在 抗原结构相同，生化反应不同，应加做生化反应 生化反应符合，玻片凝集试验阴性，无Vi抗原，应：重新观察生化反应；传代以恢复原有抗原性。 肠热症不同标本细菌培养情况 血清学诊断－－肥达反应 原理：用已知伤寒沙门菌O、H抗原和甲型副伤寒沙门菌、乙型副伤寒沙门菌、丙型副伤寒沙门菌H抗原与病人血清作半定量凝集试验，以测定受检血清中有无相应抗体及其效价。 意义：协助诊断肠热症（伤寒与副伤寒） 肠热症病人血清抗体出现情况 血清学诊断－－肥达反应 肥达反应结果判定： O效价≥1：80 H效价≥1：160 副伤寒H效价≥1：80 O与H抗体的诊断意义： O、H效价均升高：已感染伤寒 O、H效价均低于正常值：未感染沙门菌或免疫力低下 O升高、H正常：某型沙门菌感染早期 H升高、O正常：以往接种过疫苗或非特异性回忆反应 双份血清的肥达反应： 后一次较前一次抗体效价增高四倍以上，有诊断价值 沙门菌鉴定依据 沙门菌鉴定主要依靠生化反应和血清学诊断 肠道选择平板上无色半透明菌落 KIA：KA－ +/- MIU：－ ＋/－ － 与A-F多价O诊断血清和相应O因子血清、H因子血清凝集 注意Vi抗原的存在；注意抗原结构相同的菌株，应加做生化反应进行鉴别 伤寒带菌者的检测 从标本中分离出病原菌 血清中检出Vi抗体，效价≥1：10 几种沙门菌的主要生化反应 沙门菌菌落 耶尔森菌属 鼠疫耶尔森菌 形态染色：革兰阴性球杆菌，两端浓染，有荚膜，无芽孢，无鞭毛。在陈旧培养基或3％NaCl中呈多形性。 培养特性 兼性厌氧 营养要求不高 最适温度25～30℃ 在肉汤中形成的菌膜可呈钟乳石状下垂。 在血平板形成柔软、黏稠菌落 生化反应 氧化酶－ 苯丙－；葡盐－ 分解葡萄糖产酸不产气 IMViC：－＋－－ 动力－ 赖氨酸、鸟氨酸脱羧均－ 脲酶－ 明胶液化－ 临床意义 致病物质：鼠毒素、内毒素、荚膜等 所致疾病：甲类传染病－－鼠疫，为人畜共患的传染病 传播途径： 鼠－－→鼠 ； 鼠－－→人 ；