[工学]2-酶学基础.ppt

第六节 单链DNA内切酶 Nuclease S1活性 降解双链核酸中（如限制酶酶切形成）的单链突出端 催化单链DNA或RNA的降解 酶浓度过高会引起双链DNA、RNA和DNA/RNA杂合体断裂 切掉双链核酸中的单链区，甚至单个碱基 用途： 1、SNP分析 2、用mRNA测定基因中的外显子序列 二、Bal 31核酸酶 1. 来源： 埃氏交替单胞菌（Alteromonoas espejiana） 2. 功能： 既有单链特异的DNA（RNA）内切酶； 又有双链特异的DNA外切酶。降解双链DNA或其上的单链缺口、未配对的单链区域。 1. 特点：具内切酶活性，作用于ds -DNA，但无核苷酸序列特异型，产生5’-P低聚核苷酸; Ca2+ , Mg 2+ 或Ca2+ , Mn2+可使酶活达最大值。 当酶浓度很低时，ds -DNA分子上将形成切口，不同类型二价阳离子对两条链上切口位置形成有以下影响：Mg 2+存在时，两条链上的切口独立无关，Mn2+存在时，两条链上的切口几乎在同一位。 2. 用途 1) 切口移位，制备DNA探针 2) 制备RNA样品时除去DNA分子 3) 基因突变时产生切口 RNase A：专一性作用于单链RNA，最终产物为带3’磷酸的嘧啶和末端为磷酸嘧啶的寡核苷酸。耐热性高，100℃，不失活。 用途：DNA