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输血前免疫血液学检查---疑难配血
输血前免疫血液学检查---疑难配血
血液标本的采集及准备
1. 输血申请单:必须含有病人姓名、住院号、床号及负责医师的签名。还应包含申请日期、用血原因及时间、用血种类及数量;年龄、性别、种族、疾病诊断、输血史、妊娠史、输血反应史、有无不规则抗体及血型等。
2. 受血者血样: ① 认真核对后,方可采集; ② 血液标本必须收集到有正确标记的带塞子的试管里,且标明病人姓名、住院号、采集日期及采集者; ③ 血液标本应是不抗凝血,以避免纤维蛋白、抗凝剂成分对血清学试验的干扰; ④ 溶血或混入静脉输注液体而致标本稀释的血液标本不得使用; ⑤ 须用输血前3天以内采集的血液标本; ⑥ 输血后,病人的血液标本须在4℃至少保存7天,以备重复试验。 ⑦用右旋糖酐、聚乙酰吡咯酮(PVP)等大分子物质治疗后采集的血标本(如已标记说明应将红细胞洗涤)。脂肪乳可干扰配血实验结果,在输用脂肪乳之前应抽取血标本备用
3. 献血员血样: ① 从血袋上附着的血样小辫获得献血员血液标本; ② 在标本收集管上粘贴血袋上有关血液制品号的条形码标签; ③ 准确核对血袋上及标本管上的号码。
血清学试验
一、受血者试验
(一)血型鉴定
1. ABO血型鉴定:
⑴ 常规鉴定: ① 正定型:用抗-A抗-B试剂检测受血者红细胞。 ② 反定型:用A和B型试剂红细胞检测血清中的抗体。 人ABO血型是由红细胞的抗原和血浆/血清中的抗体所决定,因此正反定型的结果应该一致。
表1 常规ABO正反定型试验
正定型 反定型 血型 抗-A 抗-B A B ? O 0 + + 0 + 0 0 + A 0 + + 0 B + + 0 0 AB
正定型 反定型 自身对照 抗-A 抗-B 抗-AB 抗-A 抗-H A1 A2 B O ?
⑶ 如果无法找到正反定型不一致的原因,则只能给病人输注O型红细胞,病人血型可请血液中心血型参比试验室协助鉴定。
⑷ ABO定型不一致的原因:Ⅰ、反定型试验出现弱反应或缺失抗体:?新生儿;?老人;?低球蛋白症的白血病人或淋巴瘤病人(恶性);?使用免疫抑制剂而致低球蛋白的病人;?先天丙球缺乏的病人;?免疫缺陷者;?骨髓移植病人;?双胞胎嵌合体。Ⅱ、弱反应或缺失抗原:? A亚型、B亚型或AB亚型;? 白血病导致A或B抗原减弱,何杰金病有时会抑制抗原表达,与白血病类似;?某种疾病(如腹腔癌、胰腺癌)导致血浆中存在大量的型物质,中和抗-A或抗-B抗体,引起正定型为假阴性或弱阳性;洗涤红细胞可解决此问题;?获得性B;? 抗-A或抗-B试剂中存在低频抗原的抗体。Ⅲ、蛋白或血浆不正常引起的正反定型不符:? 某些疾病导致球蛋白水平增高引起缗钱状凝集,纤维蛋白原水平的增高也会引起缗钱状凝集,导致假阳性凝集;?洗涤红细胞 血浆增溶剂(葡聚糖、PVP)也会引起缗钱状凝集。 ?Ⅳ、其他原因引起的正反定型不符:? 多凝集:当病人感染细菌或病毒后,病毒或细菌产生的酶使红细胞上掩蔽的T抗原暴露激活,由于正常人血清中都含有抗-T抗体,因此可与正常人血清产生凝集反应,正定型试验假阳性;? 冷自身抗体引起的自家凝集反应,正反定型均可出现假阳性;?DAT及IAT均阳性。 存在ABO系统的意外抗体,如A2或A2B个体血清中可能存在天然抗-A1,导致反定型试验多出抗体;?被检者血清中存在ABO系统以外的同种抗体,反定型时出现假阳性反应;? 非抗-A及抗-B的抗体与相应抗原形成复合体吸附在红细胞表面,引起正定型非特异性凝集,如抗-B的染料吖啶黄。? 2. Rh(D)血型鉴定:
⑴ Rh(D)抗原检测原则: ① 对受血者常规一般只测Rh(D)抗原,而对献血员不仅要检查Rh(D)抗原,并在其为阴性的前提下必须进一步确定是否为弱Rh(D)(即D U)。 ② Rh(D)阴性及弱D的受血者只能提供Rh(D)阴性血,不得使用D阳性及弱D的血。即弱D针对受血者而言为D阴性,而对于供血者而言则为D阳性。 ③ 对直接抗人球蛋白试验阳性的Rh(D)阴性红细胞进行Rh(D)定型时,易引起假阳性反应,因此必须按照试剂生产商的试剂使用说明书要求,增加对照试验。
⑵ Rh(D)抗原检测方法: ① 试管法; ② 微柱凝胶法。
(二)、不规则抗体的检测和鉴定:
1. 血型不规则抗体检测:必须对有输血史、妊娠史或短期内需要接受多次输血者及交叉配血不合者
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