1冯东阳黑曲霉的培养.docVIP

黑曲霉的培养 一、实验简介 黑曲霉广泛分布于世界各地的粮食、植物性产品和土壤中。是重要的发酵工业，可生产酸性蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、葡萄糖氧化酶、葡糖酸和没食子酸等。生长适温37，最低相对湿度为88%培养基1 称量：按照培养基配方，依次准确地称取药品，放入搪瓷杯中。 2 熔化：量取自来水，加入所需水量的一部分至上述搪瓷杯中，用玻璃棒搅拌，待药品溶解后，加入琼脂，倒入余下的水，在电热板上加热熔化。 3定容：将加热后的培养基导入量筒中，用自来水进行定容，至1000ml。 4 调pH：待培养基稍冷却后，用精密pH试纸测量培养基的原始pH，若偏酸，用1mol/L NaOH边滴加边搅拌，使之达到pH5.0-6.0。若偏碱，则用1mol/L HCl调节。 5 分装：用分装装置将培养基装入试管，高度为试管总长的1/5，共20支。余下培养基转入三角瓶中，培养基的量为三角瓶容量的1/3-1/2。 6 加塞、包扎、标记：试管加棉花塞，5支一捆包扎好，棉塞外加一层报纸防灭菌时冷凝水湿润棉塞，在外用线绳扎成活结，；三角瓶用纱布塞住瓶口，并用牛皮纸的线绳包扎好。用记号笔注明培养基名称、班级、组别、配制日期。 7 灭菌：0.1MPa，121℃，20min高压蒸汽灭菌。 8 搁置斜面：待已灭菌的试管培养基冷却至50℃左右，将试管口端搁置在有合适高度的器具上，使培养基斜面长度不超过试管总长的一半为宜。 9 倒平板：待三角瓶中培养基冷却至50℃左右，倒平板。 10 无菌检查：灭菌培养基放入37℃培养箱中一天，若无细菌污染则说明灭菌彻底。 （三）、接种培养 将配置好的土壤悬液10ml接种到装有查氏培养基60ml的锥形瓶中，静置培养6-7天（23～28培养）黑曲霉刚开始培养的时候是的，一定要培养一段时间后菌体才会变黑的操作最好是在生物安全柜里，但没有条件的话可以将超净台的层流关闭，并绝对要戴口罩，虽然我们的菌种都是弱化菌种，但还是有一定的危险性的。