2009年疫苗类生物制品标准提高相关课题的审定.docVIP

附件2. 2009年疫苗类生物制品标准提高相关课题的审定 根据2009年生物制品标准提高课题研究完成的情况，此次会议，与会专家分别就病毒和细菌类制品标准提高相关课题进行了审定，并形成以下意见： 一、病毒性疫苗标准提高课题审定 1鸡胚细胞制备疫苗卵清蛋白残留量 该项检测涉及的制品包括麻疹减毒活疫苗、腮腺炎减毒活疫苗、麻腮（风）减毒活疫苗以及人用狂犬病灭活疫苗（鸡胚细胞）。检测方法为目前流感疫苗卵清蛋白残留量测定法（ELISA）。欧洲药典相关标准中均设定此项检测，限度为不高于1μg/剂。与会专家讨论认为，我国相关药典标准中应增加此项检测，鉴于国内生产企业提交的检测结果远低于欧洲药典要求，因此将根据实际情况制定合理的限度指标。由于中检院和部分生产企业自检结果存在一定差异，可能与采用不同检测试剂盒有关，因此建议各有关单位进一步开展相关工作。会议要求相关生产企业同时采用国产和进口试剂盒进行检测，由中检院统一分发卵清蛋白标准品，每个品种检测至少10批；同时，还应对该检测方法的适用性方面开展相关工作，特别是对疫苗冻干稳定剂成分对检测方法是否存在干扰进行验证。相关单位应于6月30日前将检测结果报中检院并抄送药典会，提交专业委员会审议后确定该项检测的限定要求。 2减毒活疫苗细菌内毒素含量测定 与会专家讨论认为，为进一步提高减毒活疫苗的安全性、 加强对生产用辅料污染的控制，应增加减毒活疫苗细菌内毒素检测，并制定统一的限度要求。各生产企业报送的细菌内毒素检测结果基本在10EU/剂以下，个别企业的产品检测结果在10～20EU/剂之间，整体结果与地方药检所复核检测结果基本一致。 由于同品种不同生产企业的检测结果存在一定差异，会议专家建议：1）进一步规范检测方法，提供更多批次的检测结果，包括进口制品的检测情况； 2) 因半成品配制加入的辅料成分是产品细菌内毒素的主要来源，特别是稳定剂中的明胶成分，专家建议对辅料成分进行细菌内毒素的检测，确定导致同品种不同生产企业在该项检测存在差异的原因，以进一步加强对原材料的控制，　降低制品细菌内毒素含量。3）根据大部分生产企业结果，制定严格的限度要求。4）会议要求由天坛生物牵头规范检测方法、各生产企业按要求用同一鲎试剂生产企业的同批检测试剂、每个品种采用凝胶限量法检测至少20批，各药检所对同批次的制品进行复核检定，样品由所辖相关生产企业提供。同时，各生产企业还要求对相关制品使用的所有辅料成分进行细菌内毒素含量测定，每种辅料至少检测10批，于2011年6月30日前将检测结果一并报药典委员会。 3病毒性疫苗进行渗透压摩尔浓度测定 疫苗生产工艺中使用的辅料成分是影响摩尔渗透压的重要因素，与会专家讨论认为，为控制辅料配方的稳定以及批间一致性，应对病毒性疫苗产品增订摩尔渗透压测定。采用现行药典收载的摩尔渗透压检测方法检测稳定，药检所与企业自检结果基本一致。根据生产企业提交检测数据，鉴于同品种各生产企业的生产工艺、配方可能不同，以及方法学的误差，经专家讨论初步确定，生产企业分别制定各自的限度范围，按检测至少20批的结果统计，以均值的90%-110%范围设定限度。 4甲醛含量测定检测方法的修订 新建立的甲醛含量测定方法，即乙酰丙酮比色法与现行版药典三部收载的品红亚硫酸滴定法相比，最低检出限为1μg/ml（原方法最低检出限为25μg/ml），且在甲醛含量为1-100μg/ml范围内，乙酰丙酮比色法检测标准品的线性关系、检测回收率的变异系数等均优于现有方法。与会专家讨论认为，由中检院提供检测方法操作细则，相关生产企业进行扩大验证，根据验证结果由专业委员会审定后确定原方法的替代。生产企业应于2011年6月30日前将检测结果报药典会。 5重组乙肝疫苗酵母细胞宿主蛋白残留量测定方法的建立 该课题由天坛生物承担，根据课题要求采用ELISA法建立了重组乙型肝炎疫苗酿酒酵母蛋白残留量测定，但与国外相关试剂盒相比，对宿主蛋白中的P60蛋白检测回收率较低，通过对不同生产企业产品的检测表明，无法准确地检测出产品中的P60蛋白。鉴于此，与会专家讨论认为，该法有待进一步完善，应继续开展方法的灵敏度和准确性研究。该法目前尚不能替代药典收载的HPLC检测P60蛋白的方法。生产企业可采用该法对不同工艺阶段的中间产品进行内控，提高产品批间的稳定性和一致性。 6重组乙肝疫苗（CHO细胞）效力测定体外法替代动物法 重组乙肝疫苗（CHO细胞）体外相对效力测定方法的研究结果显示，该方法仍存在抗原解离不稳定、解离后的抗原含量测定能否真实反映出产品效力、以及抗原标准品的制备等问题，尚不能替代现行的动物法用于制品的效力测定，鉴于此，与会专家讨论认为，中检院应与有关生产单位协同，对供试品解离方法进行深入的研究，并完成抗原标准品制备和建立。同时，应积累更多的检测对比数据确定体外法