UPLC色谱柱新柱启用指引及使用技巧.pdfVIP

维护和使用手册 UPLC色谱柱新柱启用指南及使用技巧 目录 b. 新柱安装 I. 新柱启用 1. 管路连接 a. 基本流程 由于缺乏行业标准，不同制造商生产的接头和连接管路 b. 新柱安装 类型会有所差异。当安装新色谱柱时，必须确保连接管 1. 管路连接 路与新色谱柱匹配。如果色谱柱末端与系统接头匹配 2. 启动系统 不佳，新色谱柱的性能会受到不良影响(诸如：柱效 c. 色谱柱平衡 下降、峰形拖尾，等)或者发生渗漏。 d. 关于eCord e. 柱效测试 f. 如何测试柱效？ g. 为何全新色谱柱测试结果低于出厂报告值 (测试样品与条件完全一致时)？ II. UPLC色谱柱使用 a. 流动相与样品的制备及建议 当管路接头比色谱柱接头深度短时(常见于非沃特世 b. 色谱柱清洗与保存 系统管路连接沃特世色谱柱时)，连接死体积的产生， c. 反相与HILIC色谱柱的保存 会导致样品扩散，峰形变宽、柱效下降，甚至可能拖尾。 色谱柱体积越小，连接不当所导致的柱效下降甚至峰 拖尾就会越严重。 I. 新柱启用 a. 基本流程 色谱柱 色谱柱安装 初始平衡 柱效测试 eCord安装 当管路接头比色谱柱接头深度还长时，仅靠螺纹并不能 密封色谱柱，会导致漏液。如果流速很低、和/或柱温 较高，不易发现细微漏液现象，但色谱峰保留时间可能 会发生不规则漂移。 维护和使用手册 2. 启动系统 注意！对于HILIC色谱柱(XBridge® Amide ，XBridge HILIC， ® ■ 使用100% HPLC级别的纯水冲洗任何含有缓冲盐的泵 CORTECS HILIC)，用50倍柱体积的50:50乙腈/水溶液(可含 系统。 最终分析条件所需的浓度为10 mM的缓冲液)进行冲洗。 在首次进样之前，用20倍柱体积的流动相(初始条件) ■ 将泵系统冲洗至100%有机流动相(甲醇或乙腈)。 平衡色谱柱(参见下表中色谱柱体积)。如果采用梯度条件， ■ 将色谱柱入口端连接至系统。(注意！请确保管路连接 在重复进样之间用8-10倍柱体积的流动相平衡色谱柱。色 良好，参考“管路连接问题”)。 谱柱平衡不当会导致保留时间发生漂移。 ■ 将泵流速设置为0.05 mL/min，用100%有机流动相(甲醇 或