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[理学]转座因子的遗传分析

上一课重点内容回顾 突变的分类: 自发突变: DNA复制错误 自发的化学损伤 诱发突变: 物理诱变 化学诱变 第十二章 转座因子的遗传分析 啤酒酵母接合型的转变也是一种转座 (1) 复制型转座(replicative transposition) (2) 非复制型转座(nonreplicative transposition) (3) 保守型转座(conservative tranposition) (二) 果蝇的转座因子 果蝇的杂种劣育 ♂P ╳ ♀M 形成原因: P因子转座 Cis inhibitor (三)、玉米的转座子 McClintock 1932年开始研究玉米籽粒色斑不稳定遗传,1951年提出可转移的染色体因子(抑制因子) 玉米糊粉层颜色控制因子:Ds-Ac 系统 A C I(Ds) R Pr Ac 四、转座的机制 (一)、复制型转座机制 交错切割 靶位点 Tn 共联体 供体 受体 共联体 同源重组 共联体拆分 供体 受体 Tn DR Tn DR *第八章 遗传重组 * 染色体数目变异: 整倍 非整倍 1951年McClintock通过对玉米种子色斑的研究,首次发现了可转移的控制因子(transposable element)。 一、转座因子的发现 玉米糊粉层色斑不稳定遗传是由可转座因子Ac-Ds引起(1947-1950) DNA的双螺旋结构中双链严格互补的关系阐明了基因的遗传稳定性 -1953 1967年,Starlinger在大肠杆菌半乳糖操纵子突变型研究中,发现一种半乳糖的突变体,称为gal-; ①回复突变率高:表明不可能属于缺失或移码突变; ②用诱变剂对其处理并不能提高回复突变率:可能不是点突变。 基因转座现象的再次发现与证实: Jordon、Starlinger和Shapiro的密度梯度离心实验 表明λdgal– 片段有所增长 突变型与野生型DNA分子杂交出现茎环结构 第一次发现了细菌中的可转移的插入序列 DNA转座现象的一般遗传特点: a) 不依赖 供体位点(Donor site)与 靶位点(Target site)间序列的同源性(非同源重组过程 ,不依赖 recA 酶) ; b) 转座插入的靶位点并非完全随机; Hotspots (热点) Regional preference ( 在3kb区域内的随机插入) c) 某些转座因子(Tn3)对同类转座因子的插入具有排他 性(免疫性); d) 靶序列在转座因子两侧会形成正向重复(DR); e) 转座因子的切除与转座将产生复杂的遗传学效应; Transposition Inversion / Translocation l? 特定的基因片段 断点随机的任意DNA片段 可能破坏某结构基因 l? U.V / 诱变剂无效 U.V / 诱变剂可提高频率 l? 高频率的回复突变 不能产生回复突变 l?? 转座需 transposase Rec.A, B, D inverted repeat (IR) χ(chi) site, l? 与复制有关的过程 DNA链的断裂与错接的过程 与倒位 / 易位染色体结构变异现象的区别 : 转座 倒位 / 异位 1). 插入序列(inserted sequence,IS) 2). 转座子(transposon,Tn) 3). 转座噬菌体(mutator phage,Mu) 二、原核生物转座因子的类型 (一)、 插入序列(inserted sequence, IS) IS 结构模式图 IR (inverted repeat sequence) 18-41 bp 转座酶基因 含有IS的质粒经变性后形成颈环结构 IS的结构和特性 DR(bp) IR(bp) 中心区域 (bp) 靶的选择 拷贝数 IS1 9 23 768 随机 5 ~ 8 IS2 5 41 1327 热点 5( 在 F 因子上为 1) IS4 11 ~ 13 18 1428 AAN20TTT 1 或 2 IS5 4 16 1195 热点 ? IS10R 9

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