植物细胞工程的概念和发展过程.doc

第一章 植物细胞工程的概念和发展过程 第一节 植物细胞工程的概念和应用 一、植物细胞工程的概念与应用领域 植物生物技术（Biotechnology）是现代遗传学、细胞生物学和分子生物学的一个复杂集合体，是以生命科学为基础，利用生物体系和工程原理生产生物制品和创造新物种的综合性科学 技术。 植物细胞工程所涉及到的主要技术为植物组织与细胞培养、植物细胞大批量培养、植物细胞融合、植物染色体工程、植物细胞器移植、DNA重组与外源基因导入及以上技术与物理、化学技术的结合，主要应用于花卉和苗木离体快速繁殖、植物新类型的创造和品种改良以及次生代谢物质生产等领域。 二、植物细胞工程在作物品种改良中的应用 通过植物生物技术改良作物是20世纪70年代以后农业科学中最重要的发展之一，对了解、操作、修饰和保护农作物种质具有潜在价值。20世纪70年代以后，随着生物技术和分子生物学的发展，植物生物技术备受重视，并开始应用于作物品种改良。但对于体细胞无性系变异的存在，曾经有过怀疑和争论，焦点在于这种变异有无遗传基础，后代能否稳定遗传，在作物品种改良中有无实际应用价值。直至20世纪90年代初，随着研究手段的提高，大量研究证明，体细胞无性系变异确实存在并可以遗传，可应用于作物品种改良，并且在有些作物上获得成功，如小麦（胚培养和细胞培养）、水稻（原生质体培养）、大豆（原生质体培养）等。不断有许多成功的实例应用于生产，进展速度比过去预期要快，但困难和障碍仍有待克服。 植物生物技术在作物品种改良和次生代谢产物生产以及脱毒培养等中的应用具有很多优点，尤其是在作物品种改良中的应用比传统育种方法具有如下优点：① 应用植物生物技术进行作物品种改良可以省时省力；② 进行品种改良可以更有的放矢；③ 可供选择的变异范围广；④ 可作为拯救远缘杂交杂种胚发育中止的手段。但由于传统方法可以为植物生物技术的应用提供变异基础，因此，植物生物技术手段必须与传统育种方法相结合才更有生命力。 植物细胞工程在农业上的应用主要有以下几个方面。 1. 幼穗、幼胚、胚珠和子房以及试管受精克服远缘杂交不育性与扩大遗传变异范围在许多作物远缘杂交育种中都得到广泛应用 幼胚培养作为解决种间、属间等远缘杂交中杂种胚停止发育的手段已在许多作物的远缘杂交育种中广为应用。离体幼胚培养可用于杂种育种。早在20世纪20年代，Laibach（1925）通过培养亚麻种间杂交时形成的幼胚成功地获得了杂种，从而开创了植物胚胎培养的应用。其后，20世纪30年代，不少人在果树胚胎上做了很多工作，所培养的胚都较大。LaRue（1936）通过研究认为，小于0.5 mm的胚的培养不能成功。20世纪40年代起，由于对离体幼胚培养中营养需要的大量研究，主要是在培养基中加入椰子汁、麦芽提取液等物质，从而使培养心形期或比心形期更早时期的胚（0.1～0.2 mm）获得了成功。我国胚培养（简称胚培）开始较早，但主要用于裸子植物。建国后，中国科学院植物研究所、遗传研究所和北京大学生物系相继开展这一工作，并取得一定进展，如大小麦杂种幼胚、小麦和山羊草胚培养等。东北农业大学小麦研究室自1983年以来也开展这一工作。胚培养成功地用于远缘杂交育种和种内杂交育种实践，同时也广泛地利用胚培养技术研究胚胎发育和与胚胎发育有关的内外因素，以及与其发育有关的代谢生理生化变化。 在胚胎发生初期就停止发育的胚，不仅取胚困难，而且培养条件也很差，但通过胚珠培养或子房培养可以获得完全成熟的种子。 在以往的杂交工作中，柱头、花柱与花粉的萌发，花粉管伸长之间的不亲合性是很大障碍。Kanta（1963）用花菱草等植物直接将花粉散布在置于培养基上的未受精胚珠上受精成功。随后，我国西北生物研究所在小麦和烟草等作物上进行的试管受精试验均获成功。这一技术的成功运用使远缘杂交在作物改良中的利用前景更广阔。 2. 花药、花粉培养育成单倍体植株，培育成功的植物很多，如小麦、大麦、水稻、橡胶等 利用花药、花粉培养（简称花培）育成的单倍体植株，经过染色体加倍，可在短期内育成遗传变异稳定的株系，有利于缩短育种年限。我国花培在20世纪70年代后发展迅速，处于世界领先地位并首次成功获得小麦花培单倍体植株，培育出许多有实用价值的品种，如冬小麦京花一号，水稻和烟草等也有育成品种应用于生产。我国的花培技术日趋完善，研究单位虽然减少，但工作逐渐深入，如利用花培中产生的异源代换系和附加系等材料进行遗传学和细胞学方面的研究，并在实际应用中将花培与常规育种技术密切结合。 3. 原生质体融合产生体细胞杂种，在烟草属植株物种间细胞融合获得成功 通常在受精时可以看到细胞融合，雌雄配子体融合而形成合子，但在远缘植物及无亲缘关系的植物间，甚至动植物间，这种生殖细胞的融合困难很大，甚至完全不可能，然而通过体细胞进行融合就可能实现。