课程名称生物切片技术.doc

生物技術 國立中興大學教授 林金和 編著 200年月 印製 課程名稱：生物技術 開設系所：中興大學 授課教師：林金和教授內容綱要： 1. 課程介紹、器材、空間分配、操作分組及實驗室規則…….……..2. 徒手切片法………………………..………………………………...2-1. 徒手切片法……………………..……………………………...2-2. 徒手切片法流程………………..…………………………….3. 光學顯微鏡的系統校光…………………………………………...14. 生物標本之整體包埋法…………………………………………...14-1. 表皮永久包埋的過程………………………………………...14-2. 洋蔥球莖表皮薄片的製備…………………………………...15. 植物組織印染法及In situ Hybridization…………………………..6. 石臘包埋切片法…………………………………………………...6-1. 三級丁醇脫水步驟及說明…………………………………...6-2. 石臘切片法示範參考流程…………………………………...6 6-3. 動物材料之石臘切片流程…………………………………...6-4. 埋臘切片法…………………………………………………....7. 冷凍切片法………………………………………………………...8. 生物標本之物理及化學急速脫水法……………………………9. 木材切片…………………………………………………………10. 葉肉單細胞的分離………………………………………………11. 顯微照相技術……………………………………………………11-1. 手動式顯微照相操作說明………………………………….11-2. 拍黑白片的注意事項………………………………………11-3. 螢光顯微鏡照相流程說明………………………………….12. 塑膠包埋切片法…………………………………………………13. 根尖抹片技術……………………………………………………13-1. 醋酸洋紅溶液的製備與染色……………………………….13-2. DNA之Feulgen染色法……………………………………14. 以乾冰法製備永久切片………………………………………….15. 花柱中花粉管之螢光法染色及觀察……………………………16. 碳水化合物之組織化學定位－PAS法…………………….….78 17. 免疫金之免疫組織化學法……………………………………….17-1. 免疫光學顯微鏡術………………………………………17-2. 石臘切片法進行百合花藥之免疫金定位………………83 17-3. 石臘切片法進行百合花藥之螢光定位…………………17-4. 內生荷爾蒙於組織上之定位……………………………84 18. Fluorescence Immunolabeling of Paraffin Embedded Sections..…88 19. Immunofluorescence on Root Tip Cells from Pea…………..……92 20. 數位式相機之顯微照像操作流程…………………………….98 21. 根段培養和有絲分裂週期之測定……………………………122. 自動放射顯影技術……………………………………………..123. 植物表面之印模技術…………………………………………...124. 保衛細胞中鉀離子的測定……………………………………....1 24-1. 氣孔打開時保衛細胞中鉀離子的累積……………….124-2. 在顯微鏡下偵測顯微切片之鉀離子…………………….125. 葉片透化法……………………………………………………...125-1. 葉片透化法………………………………………………..125-2. 葉片透化法…………………..……………………………126. 木材纖維解離法………………………………………………...127. 根毛玻片之製備………………………………………………...1Histochemical (GUS) analysis of transgenic plants.....................117 29. 獨立計劃………………………………………………...1. 生物技術期末作業………………………………...….….11. 實驗室規則 下列規則為任何稱職的技術員所自守的。若遵守這些規則，初學者可避免許多麻煩。 （1）最首要的：一切要乾淨。 （2）知道你在幹什麼。若稍有疑問，要立刻停下來，弄清楚了才進行下去。千萬不要趕實驗---這是最常見導致悲痛的原因。 （3）桌子要一直保持整齊。每一樣東西要有固定的位置。所有的化學藥品、染劑和溶液都要做標記；不要光靠記憶力