CN107389838-CN201710650981-基于一测多评法的补骨脂药材检测方法.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 107389838 A (43)申请公布日 2017.11.24 (21)申请号 201710650981.8 (22)申请日 2017.08.02 (71)申请人 浙江大学 地址 310058 浙江省杭州市西湖区余杭塘 路866号 (72)发明人 栾连军　沈晓宇　刘雪松　吴永江　 (74)专利代理机构 杭州求是专利事务所有限公 司 33200 代理人 赵杭丽 (51)Int.Cl. G01N 30/06(2006.01) G01N 30/74(2006.01) G01N 30/86(2006.01) 权利要求书1页 说明书11页 附图2页 (54)发明名称 基于一测多评法的补骨脂药材检测方法 (57)摘要 本发明提供一种基于一测多评法的补骨脂 有效成分的含量测定方法，首先建立补骨脂中10 种主要药效成分的HPLC含量测定方法，以补骨脂 素作为内标参照物，计算其他9种活性成分的相 对校正因子，并考察相对校正因子的系统适用性 和方法重现性，根据相对保留时间进行色谱峰定 位，再结合相对校正因子计算各待测成分的含 量，通过一测多评法与外标法的相互验证，证明 结果无显著差异。本发明方法克服了对照品成本 高、不易得等难题，通过相对校正因子及色谱峰 定位计算指标成分含量，实现补骨脂中多种药效 物质的同步测定既可节省成本、简化操作，提高 A 效率，且检测灵敏度高，稳定性好，测定结果准确 8 可靠，对补骨脂质量控制和临床疗效的保证具有 3 8 9 重大意义。 8 3 7 0 1 N C CN 107389838 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.基于一测多评法的补骨脂药材检测方法，其特征在于，通过以下步骤实现： (1)对照品溶液的配制：分别称定补骨脂苷、异补骨脂苷、补骨脂素、异补骨脂素、新补 骨脂异黄酮、补骨脂甲素、补骨脂乙素、补骨脂二氢黄酮甲醚、corylifol A、补骨脂酚对照 品，置于容量瓶中，加甲醇溶解并定容，摇匀，得各对照品储备液，并配制成补骨脂混合对照 品溶液； (2)供试品溶液的配制：称取补骨脂药材粉末，过3号筛，置于具塞锥形瓶中，加入溶剂 进行提取，提取液离心后，过滤，即得； (3)确定相对校正因子：取步骤(1)中制备得的混合对照品溶液，分别进样2,4,6,8,10, 20μl，进行色谱条件检测分析，得到高效液相色谱图并计算各色谱峰的峰面积，选定补骨脂 素为内参物，分别计算补骨脂苷、异补骨脂苷、异补骨脂素、新补骨脂异黄酮、补骨脂二氢黄 酮甲醚、补骨脂甲素、补骨脂乙素、corylifol A、补骨脂酚的相对校正因子，取平均值，即 得； (4)样品的含量测定：取步骤(2)中的供试品溶液进样高效液相色谱分析，获得液相色 谱图，根据相对保留时间进行峰定位，并结合相对校正因子计算各目标化合物的含量，与外 标法测定结果进行比较分析。 2.根据权利要求1所述的基于一测多评法的补骨脂药材检测方法，其特征在于，所采用 的流动相为乙腈(A)—0.1％磷酸(B)系统，梯度洗脱时间程序为：0-5min，10％→18％A；5- 20min，18→20％A；20-25min，20→46％A；25-35min，46％→54％A；35-48min，54％→58％A； 48-55min，58％→65％A；55-65min，65％→70％A；65-75min，70％→85％A。 3.根据权利要求1所述的基于一测多评法的补骨脂药材检测方法，其特征在于，色谱条 件为