CN107385020-CN201710484187-瘦素在人重组FGF21蛋白活性检测中的应用.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 107385020 A (43)申请公布日 2017.11.24 (21)申请号 201710484187.0 (22)申请日 2017.06.23 (71)申请人 西安医学院 地址 710021 陕西省西安市未央区辛王路1 号 (72)发明人 赵玉峰　陈镝　赵妍妍　苏兴利　 徐曦　闫爱丽　魏兰兰　梁向艳　 谢荣　刘英光　 (74)专利代理机构 西安弘理专利事务所 61214 代理人 蒋姝泓 (51)Int.Cl. C12Q 1/68(2006.01) 权利要求书1页 说明书4页 附图3页 (54)发明名称 瘦素在人重组FGF21蛋白活性检测中的应用 (57)摘要 本发明公开的瘦素在人重组FGF21蛋白活性 检测中的应用，以诱导分化的脂肪细胞为对象， 采用定量反转录聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测 FGF21处理后脂肪细胞的瘦素表达水平程度，进 而确定人重组FGF21蛋白的活性。本发明发现瘦 素表达水平与所用人重组FGF21蛋白浓度之间存 在量效关系，从而确定脂肪细胞瘦素表达水平可 成为FGF21活性检测的新指标，该方法操作的可 靠性强，具有很好的实用价值。 A 0 2 0 5 8 3 7 0 1 N C CN 107385020 A 权　利　要　求　书 1/1页 1.瘦素在人重组FGF21蛋白活性检测中的应用。 2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的瘦素基因表达水平与人重组FGF21 蛋白的添加浓度的关系为：当人重组FGF21蛋白的添加浓度c≥10ng/ml时，瘦素基因表达水 平随人重组FGF21蛋白的添加浓度的增加而减少。 3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的瘦素基因表达水平通过定量PCR方 法检测。 4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述的定量PCR方法检测过程中，瘦素的引 物序列为： 上游引物：5’-CTC CAA GGT TGT CCA GGG TT-3’； 下游引物：5’-AAA ACT CCC CAC AGA ATG GG-3’。 5.用于判断人重组FGF21蛋白活性的瘦素，其特征在于，所述的瘦素基因表达水平被人 重组FGF21蛋白浓度下调，且呈剂量依赖性下降。 6.根据权利要求5所述的用于判断人重组FGF21蛋白活性的瘦素，其特征在于，所述的 瘦素为脂肪细胞内的瘦素。 2 2 CN 107385020 A 说　明　书 1/4页 瘦素在人重组FGF21蛋白活性检测中的应用 技术领域 [0001] 本发明属于瘦素应用技术领域，具体涉及一种瘦素在人重组FGF21蛋白活性检测 中的应用。 背景技术 [0002] 肥胖和2型糖尿病相关的药物研发一直是科研与开发领域的热点。在肥胖和2型糖 尿病模型小鼠以及人类患者的研究发现，FGF21重组蛋白可减轻体重、降低血脂、降低血糖、 显著减轻肥胖和2型糖尿病及其并发症。因此，在肥胖和2型糖尿病相关药物研发的众多候 选分子中，成纤维细胞生长因子21(FGF21)是一个研发热点。 [0003] 建立一个稳定高效的药物效果检测体系是评价候选药物的关键。一个客观评价 FGF21重