CN107094705-CN201710290284-一种模拟人工假体材料体外染菌所致大白兔感染的动物模型构建方法.pdfVIP

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 107094705 A (43)申请公布日 2017.08.29 (21)申请号 201710290284.6 (22)申请日 2017.04.28 (71)申请人 华南理工大学 地址 510640 广东省广州市天河区五山路 381号 (72)发明人 王迎军　朱宇晨　王琳　任力　 杨军忠　 (74)专利代理机构 广州粤高专利商标代理有限 公司 44102 代理人 何淑珍 (51)Int.Cl. A01K 67/02(2006.01) 权利要求书2页 说明书8页 附图9页 (54)发明名称 一种模拟人工假体材料体外染菌所致大白 兔感染的动物模型构建方法 (57)摘要 本发明公开了一种模拟人工假体材料体外 染菌所致大白兔感染的动物模型构建方法，该方 法包括如下步骤：（1）动物的选择及饲养条件； （2）菌种的选择及培养；（3）动物麻醉；（4）人工假 体材料体外染菌过程的模拟；（5）动物染菌模型 建立；（6）术后动物观察；（7）动物染菌模型评价。 本发明通过构建一种实用、可行的大白兔感染动 物模型，为人们研究人工假体材料体外染菌所致 的细菌感染提供动物实验模型以及检测指标。 A 5 0 7 4 9 0 7 0 1 N C CN 107094705 A 权　利　要　求　书 1/2页 1.一种模拟人工假体材料体外染菌所致大白兔感染的动物模型构建方法，其特征在 于，包括以下步骤： （1）动物的选择及饲养条件：挑选新西兰大白兔在室温通风条件下饲养与实验； （2）菌种的选择及培养：首先用接种环轻挑斜面金黄色葡萄球菌加入到营养肉汤培养 基培养，至细菌达到中等浓度，然后，在无菌条件下通过划线方法接种于营养琼脂板上，再 用接种环挑取单个菌落，接种于新的营养肉汤培养基中，将菌管放入恒温摇床中培养，此时 细菌处于稳定生长期，次日，采用麦氏比浊法，用新鲜营养肉汤培养基调节细菌浓度； （3）麻醉：新西兰大白兔麻醉之前称量体重，配合使用戊巴比妥钠和速眠新麻醉剂对动 物实施麻醉，给药时观察肌肉紧张程度，角膜反射情况，当肌肉紧张程度与角膜反射情况较 弱或消失时即完全麻醉； （4）人工假体材料染菌过程的模拟：棒状钛金属经无菌处理后，置于无菌离心管内，浸 没于步骤（2）制备的金黄色葡萄球菌溶液中，其后将含有菌液和材料的EP管放在恒温培养 箱中培养； （5）动物染菌模型建立：将新西兰大白兔成功麻醉后，固定于手术台上，沿小腿胫骨内 侧至膝关节周围剃毛，采用碘伏溶液对手术区域皮肤消毒，自右胫骨干骺端纵行切开，显露 近侧干骺端，经骨钻造孔至骨髓腔，而后放出少量骨髓，从钻孔处注入鱼肝油酸钠注射液， 后将步骤（4）所得浸泡菌液后的假体材料植入胫骨缺损处，骨蜡封闭，手术缝合； （6）术后动物观察：待实验新西兰大白兔麻醉清醒后单笼饲养，笼内自由活动空间合 适，饲养标准均统一，术后不使用任何抗菌药物； （7）动物染菌模型的评价：观察新西兰大白兔的体征情况，进行血液常规指标检测、微 生物学检测、病理组织观察。 2.根据权利要求1所述的一种模拟人工假体材料体外染菌所导致大白兔感染的动物模 型构建方法，其特征在于，步骤（1）所述新西兰大白兔为雄性，3只，体重2.0±0.5 kg，3 4月~ 龄。 3.根据权利要求1所述的一种模拟人工假体材料体外染菌所致大白兔感染的动物模型 构建方法，其特征在于，步骤（2）所述金黄色葡萄球菌购于美国模式培养物集存库ATCC；所 述培养均是在32 3