以液相层析串联质谱分析法同时定量尿液中种苯二 监识科学学会.pdfVIP

D1 D1 以液相層析串聯質譜分析法同時定量尿液中29種 苯二氮平類及鎮靜安眠藥成分 1 1 2 1* 劉秀娟 、欒心芸 、劉瑞厚 、林棟樑 1 法務部法醫研究所 毒物化學組 2 輔英科技大學 醫技系 * E-mail: dllin@.tw ; Tel: 02ext. 700 摘要 苯二氮平類（Benzodiazepines ）是屬於具有鎮靜、安眠、肌肉鬆弛及抗痙孿作用的藥物，最常用 於治療焦慮及睡眠障礙，同時服用酒精或某些藥物例如鴉片類、抗憂鬱劑則會有加成作用。近年來發 現它有被廣泛地濫用的趨勢，在很多國家已經變成一個嚴重社會問題，尤其在藥物過量使用之法醫案 例屍體中經常被發現。本研究建立簡單、準確與快速之液相層析三段四極柱串聯質譜分析法，同時定 量分析生物檢體 29種苯二氮平類及鎮靜安眠藥成分。尿液檢體以同位素氘化物為內部標準品，加入 β-glucuronidase 於60 OC 進行水解2 小時後，經液相-液相萃取及注入儀器分析，評估分析 LC/MS-MS 儀器之最佳分析條件同時定量分析尿液中苯二氮平類成分之方法。液相層析管柱為 Zorbax SB-Aq (Agilent 2.1 mm x 100 mm, 1.8 μm particle) ，移動相為含0.1%甲酸之甲醇及水，流速為0.32 mL/min ， 以正電離子模式電灑游離法(ESI)配合多重反應偵測 (MRM)進行定量方法評估分析。1 mL 空白尿液配 製濃度為20-400 ng/mL 等5種不同濃度，平均萃取回收率除 brotizolam 88% 、zaleplon 85%及 zopiclone 73%外，其他成分均大於 90% ；精密度評估同日內的偏差除bromazepam 為 5.23-19.91% 、clobazam 3.81-16.30% 、7-aminonitrazepam 1.55-17.62%略偏高外，其餘藥物則介於 1.55-14.73% ；異日間確效之 精密度評估部分，除 clobazam 5.20-15.86% 、7-aminonitrazepam 2.76-20.66% 、hydroxytriazolam 3.79-17.83%略高之外，其餘藥物則在 1.18-14.50 %之間，均在於可接受範圍(CV % ＜15%) 。在濃度 20-400 ng/mL範圍下呈現良好的線性關係，線性關係 (r2)均在0.997 以上；最低檢測極限(LOD)大部分 成分均在2 ng/mL 以下；最低定量極限(LOQ)均在5 ng/mL 以下。基質效應評估實驗，離子抑制作用 大部份成分小於20% ，使用穩定同位素標定的內標準品定量，將可消去因基質效應對於游離源離子化 所產生的改變。以完成之實驗方法，已成功應用於各地方法院檢察署送驗之不明死因相驗及解剖之法 醫毒物案件中 29種苯二氮平類及鎮靜安眠藥成分之含量檢測。 關鍵字 ：苯二氮平類成分、生物檢體、定量分析、液相層析串聯質譜分析法 D2 D2 環境溫度變異對於電化學式酒測器性能影響評估 1