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[ 应用纪要 ] 使用针对临床研究的复合模式SPE和亲水作用色谱 (HILIC) 对血浆儿茶酚胺和变肾上腺素进行快速、同步分析 Jonathan P. Danaceau, Erin E. Chambers和 Kenneth J. Fountain 沃特世公司(美国马萨诸塞州米尔福德) 应用优势 简介 ■ 无需离子对试剂即可实现单胺神经 临床研究者通常都很关注高浓度血浆儿茶酚胺及其O- 甲基化代谢产 递质与变肾上腺素的保留与基线分离 物(变肾上腺素)的测定。但是，这些化合物(尤其是去甲肾上腺素、 肾上腺素和多巴胺)由于极性较大，利用反相LC-MS/MS对其进行分析 ■ 快速、同步定量血浆变肾上腺素和 是一项巨大挑战。因此，许多研究实验室仍采用离子对试剂与电化 儿茶酚胺 学检测(ECD)分析这类物质。虽然反相LC-MS/MS 已得到成功应用，但 由于基质组分发生离子抑制、保留不够和异丙肾上腺素与肾上腺素 未基线分离，致使挑战仍然存在。 ■ 无需进行挥干和复溶，分析物即可 浓缩4倍 1-6 亲水作用色谱(HILIC)已逐渐成为分析极性化合物的首选 。通过对之 6-7 前发表的方法进行扩展 ，本应用纪要介绍了血浆中单胺神经递质 ■ 可得到线性、准确、精密的结果， 与变肾上腺素的提取与分析方法。采用沃特世(Waters®) ACQUITY UPLC 检测限最低可达10 pg/mL BEH Amide色谱柱可实现基于HILIC的色谱分离。Waters Oasis WCX 96孔 µElution板可用来提取血浆中的这些化合物。将复合模式弱阳离子交 换固相萃取(SPE)板，与用于HILIC色谱和Waters Xevo TQ-S质谱的酰胺基 色谱柱结合使用，可获得具有出色线性、准确度和精密度的快速、稳定 沃特世解决方案 方法，并且能最大限度减少基质效应。 ® Oasis WCX 96 孔µElution板 (部件号186002499) 96孔样品收集板，700 µL圆孔 (部件号186005837) ACQUITY UPLC® BEH Amide色谱柱 1.7 m, 2.1 x 100 mm (部件号186004801) ACQUITY UPLC系统 Xevo® TQ-S质谱仪 UNIFI®科学信息系统 关键词 儿茶酚胺，变肾上腺素，HILIC，SPE， LC-MS/MS，样品制备 1 [ 应用纪要 ] 实验 表1.流动相梯度。流动相A和流动相B的组成在方法部分列出。 LC 条件 时间 流速 %A %B