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第1章第1节基因工程相关基因知识复习

第一章 绪 论 第1节 基因工程相关基因知识复习 2010.9.13 一、基因工程是生命科学研究的核心 二、如何学好“基因工程” 1、关于参考书 吴乃虎编著 基因工程原理 科学出版社 金冬雁等译 分子克隆实验指南科学出版社 生命的化学 Science Nature 2、扎实的生物学基础 3、广泛的兴趣、爱好 4、勤于动脑、勇于动手 5、思维活跃,不同学科的融会贯通 6、科学的唯一正确性 三、基因概念与基因工程的诞生 基因工程 ⒈概念:一般指利用分子生物学的手段 ,在体外操纵、改造、重建细胞的基因组,从而使生物体的遗传性状发生按人们的意志定向变异。 ⒉特点:基因工程能够打破种属的界限,在基因水平上改变生物遗传性,并通过工程化手段为人类提供有用的产品及服务。 3、理论上的三大发现 1]、40年代: DNA遗传物质 2]、50年代: DNA双螺旋 3]、60年代: 遗传密码破译 4、技术上的三大发明 1]、限制性内切酶 2]、逆转录酶 3]、载体 基因的现代概念 1、移动基因(movable genes) 概念:在染色体基因组不同位置上移动的基因。也称跳跃基因(jumping genes)。 发现:时间-40年代;地点-Cold Spring Harbor Lab.;科学家-B.McClintock (女);材料-玉米 功能:异常基因功能现象的解释 获奖:1983年Nobel 医学奖 移动基因分类: (1)插入序列 insertion sequence (IS) 原核生物存在,长度2Kb以下 共同结构特点: 1]、分子末端具有一段反向重复序列 2]、插入位点两侧为同向重复序列 Fig1-9 3]、转位酶的作用: a.催化转化因子(IS)从IR处切离 b.识别插入染色体的靶点 (2)转位子 (transposons) 由几个基因组成的特定DNA片段,长度大于2Kb,其中含有一个抗菌素抗性基因,广泛存在于原核与真核生物。 Fig.1-10; Fig.1-11 2、断裂基因(split gene) 在真核生物核苷酸序列中插入有与氨基酸编码无关的DNA间隔区,使一个基因分隔成不连续的若干区段,此种编码序列不连续的间断基因即断裂基因。 1]、内含子的一般特点 (1)不同断裂基因内含子数目差异极大 (2)不同来源内含子分子大小不同 (3)内含子长度超过外显子 (4)并非所有真核生物都有内含子 2]、mRNA初级转录本的剪辑 (1)剪辑点 Fig.1-14 (2)剪辑特异性 根据生命活动需要的剪辑 Fig.1-15 概念:在核苷酸序列上与正常功能基因基本相同,但不具功能活性的失活基因。 1977年,G.Jacq等研究非洲爪蟾5s rRNA gene cluster 发现。 根据假基因序列的特性不同分为: (1)重复假基因 此类假基因与亲本基因具有较高的同源性,在染色体区段上串联重复而名。Fig.1-16 假基因存在大量缺失和点突变。Fig.1-17 假基因如何产生? 假基因源于真基因,在进化中发生了失 活突变而功能丧失。由于基因的多拷贝 特性,一个基因功能丧失并不影响生命 存活。 此类假基因没有表现与亲本基因的相似性 而是表现出与基因转录产物的相似性。 相似性? 正常转录产物mRNA 5’-端没有promoter, 3’-端加polyA. 假基因的序列分析表明:没有启动子;没有内含子;3’-端加polyA. 加工假基因形成机理(推测): * * 1、基因工程在生物工程中的位置 生物工程是由基因工程、细胞工程、酶工程、蛋白质工程和微生物工程共同组成。基因工程是生物工程的核心。 2、对生命现象本质的认识 3、改造生命 新物种产生 生命的延续 疾病治疗 基因药物 三、基因概念与基因工程的诞生 IR Transposase IR IR Transposase IR IR Transposase IR 复合转位子 3、假基因(pseudogene) 假基因为什么无活性? mRNA cDNA DNA(基因组) 逆转录 Fig.1-18;Fig.1-19 (2)加工的假基因(processed pseudogene) 4、重复序列与重复基因 5、重叠基因,表1-6; 核苷酸序列存在着重叠的读框,因而表现出不同功能。 根据开放读框不同分为: (1)包含式:一个读框包含另一读框。 (2)交叠式:读框之间的重叠。 图1-22 结束 DNA的结构在1953年由沃森和克里克确定 DNA结构 DNA B helix right handed 10.5

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